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楼主
发表于 2012-10-25 19:57 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
分离胎盘羊膜,绒毛膜,胎盘小叶。剥除血管,清洗。
- L$ L6 z9 @) U1 J3 X+ g( y* y分别剪碎,加一型胶原酶和胰酶消化。0 ~+ a! b' b( f' H: z1 u* I
正在进行中。。。90分钟了,消化不动,求指导。
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沙发
发表于 2012-10-25 20:42 |只看该作者
胶原酶和胰酶浓度?温度?剪碎程度?请详细说明。
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藤椅
发表于 2012-10-25 20:42 |只看该作者
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; ]. v3 k' K, ?, T1 o; \4 d
; v! ?0 G9 T# c5 Z! A1 s7 ?温度适宜!建议使用水浴锅!导热比较快!稳定
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板凳
发表于 2012-10-25 20:43 |只看该作者
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建议你直接将胎盘组织切成小碎片组织培养,胶原酶消化的效率不高
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报纸
发表于 2012-10-25 23:02 |只看该作者
建议边消化边摇动  这样酶作用充分一些
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地板
发表于 2012-10-26 11:23 |只看该作者
本帖最后由 452359357 于 2012-10-26 11:42 编辑 1 W7 t0 ~/ x& B5 [, K/ @! p  L

. r3 r( F2 {* V- x! l# B" u还有就是你想提取胎盘里面的什么干细胞 是造血干还是MSC 要是MSC的话 4楼的建议不错 要是造血干的话就再加点分散酶试试 , 放在37℃水浴锅中 酶20-30分钟吹打混匀一次,消化90min即可
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发表于 2012-10-26 12:44 |只看该作者
sdyinong 发表于 2012-10-25 20:43 3 [( A; I: n  `
建议你直接将胎盘组织切成小碎片组织培养,胶原酶消化的效率不高
1 u- g( D0 v$ h# b% q
你好,请问是将胎盘组织的哪一部分剪成小片呢?

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发表于 2012-10-26 12:45 |只看该作者
452359357 发表于 2012-10-26 11:23
" ]5 `) N. C; @$ x还有就是你想提取胎盘里面的什么干细胞 是造血干还是MSC 要是MSC的话 4楼的建议不错 要是造血干的话就再加点 ...

9 P4 z$ `9 m8 s1 ^8 H4 N+ @主要还是MSC。我试过绒毛干组织块培养,失败。
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发表于 2012-10-26 12:57 |只看该作者
我养过 细胞很杂 主要是MSC
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发表于 2012-10-26 12:59 |只看该作者
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; c2 n1 t% ]# w1 v: t; \3 v2 a) S$ }0 D* K9 M' c( p" U5 S. H1 x
如果是MSC的话 羊膜可以直接用组织块培养的 其他的用酶消化比较好 主要是要没的成分 加上分散酶 消化效果会比较好 消化完成后基本都能分离出干细胞的
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