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DC和CIK的混合培养 [复制链接]

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包包
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楼主
发表于 2012-11-13 22:23 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
预实验脐血100ML,养CIK一袋,同时养了几瓶DC,CIK是培养袋养的,到11天的时候取10mlCIK加到DC培养瓶里,细胞数量的比例大概是1:5吧,前三天发现CIK增值很快,远远大于培养袋里的CIK增殖速度(培养袋的CIK状态不好),混合后第五天,发现混合培养瓶有絮状物,第六天做流式,CD3+CD56+   63%,但没有发现DC。单CIK培养的为CD3+CD56+  13%,混合培养只能养三天吗?还是有什么其他问题,请教各位老师了
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沙发
发表于 2012-11-17 23:44 |只看该作者
没有人回答吗?自己顶顶

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藤椅
发表于 2012-11-19 08:42 |只看该作者
期待高手出现

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板凳
发表于 2012-11-20 01:31 |只看该作者
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混合培养后大量增殖的是CIK细胞,DC本身就不多;如果要确定的话,用流式细胞仪检测DC细胞表面HLA—DR、0 Z# [+ e! S5 l6 {4 R( ~
CDIa、CDl4的表达。
2 y5 Y* F0 K7 T+ t0 `混合培养7天,DCIK细胞增殖数量达到最佳。
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报纸
发表于 2012-11-20 11:53 |只看该作者
但是我混合培养后,每天补充白介素2,全量补充,为什么在4--5天会出现絮状物呢?是怎么回事啊,请教了
9 L' g. }+ S5 H# {- O& T
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地板
发表于 2012-11-21 00:57 |只看该作者
出现絮状物可能有两种情况:一是增殖的细胞团;二是可能有真菌感染,可以做真菌培养检测排除。
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发表于 2012-11-21 08:58 |只看该作者
DC-CIK最好是在CIK培养七八天的时候再跟DC混合培养,混合培养之后最佳状态应该在5-10天,具体时间因标本的不同而异。
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小小研究员

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发表于 2012-11-21 09:23 |只看该作者
回复 wjp130 的帖子
8 V% W2 t7 }( r5 n; e$ z' E$ \$ J$ o1 R& ?& U% M2 H
你回复谁 就点击对方回复帖子中的回复按钮 然后输入内容 像我这样* W4 j; Z: Q1 v5 h3 @
; E2 d5 V* F( H" l& L- k8 i$ p
否则他会看不到

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发表于 2012-11-25 22:17 |只看该作者
回复 drxia 的帖子8 @) Q# }! d% @
# U0 q! U. R: s! w6 O: U: D
不可能是污染的,我做培养6年了,污染还是可以鉴别出来的,也不是细胞团,因为吹打不开,显微镜下观察,像是死细胞粘附在一起了,
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发表于 2012-11-25 22:21 |只看该作者
这几天用脐血又培养了一袋CIK,用的培养袋,第9天时候,培养基体积为1700ml,细胞计数:7的9次方,CD3和CD56双阳为90%,不可能这么高吧,是标本的个体差异??还是流式检测的问题?" ~# ]# L: j$ `$ Q# L

3 t7 H4 F) m8 m7 }$ N+ }* i$ C
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