DC和CIK的混合培养

wjp130

预实验脐血100ML，养CIK一袋，同时养了几瓶DC，CIK是培养袋养的，到11天的时候取10mlCIK加到DC培养瓶里，细胞数量的比例大概是1:5吧，前三天发现CIK增值很快，远远大于培养袋里的CIK增殖速度（培养袋的CIK状态不好），混合后第五天，发现混合培养瓶有絮状物，第六天做流式，CD3+CD56+   63%，但没有发现DC。单CIK培养的为CD3+CD56+  13%，混合培养只能养三天吗？还是有什么其他问题，请教各位老师了

wjp130

没有人回答吗？自己顶顶

sanmao85

期待高手出现

drxia

混合培养后大量增殖的是CIK细胞，DC本身就不多；如果要确定的话，用流式细胞仪检测DC细胞表面HLA—DR、! W! Z) a! y8 a. g' z" P* r
CDIa、CDl4的表达。
$ E. {3 N4 f  x混合培养7天，DCIK细胞增殖数量达到最佳。

wjp130

但是我混合培养后，每天补充白介素2，全量补充，为什么在4--5天会出现絮状物呢？是怎么回事啊，请教了
4 {: p; J5 p! G- k8 ?* }/ w+ F+ @

drxia

出现絮状物可能有两种情况：一是增殖的细胞团；二是可能有真菌感染，可以做真菌培养检测排除。

jiguojie87

DC-CIK最好是在CIK培养七八天的时候再跟DC混合培养，混合培养之后最佳状态应该在5-10天，具体时间因标本的不同而异。

细胞海洋

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否则他会看不到

wjp130

回复 drxia 的帖子& m9 o6 @- Y0 m$ L
- V! K% y: C& C
不可能是污染的，我做培养6年了，污染还是可以鉴别出来的，也不是细胞团，因为吹打不开，显微镜下观察，像是死细胞粘附在一起了，

wjp130

这几天用脐血又培养了一袋CIK，用的培养袋，第9天时候，培养基体积为1700ml，细胞计数：7的9次方，CD3和CD56双阳为90%，不可能这么高吧，是标本的个体差异？？还是流式检测的问题？
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