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楼主: sunflower636
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红细胞裂解液会把干细胞裂解了么?   [复制链接]

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发表于 2012-11-29 17:05 |只看该作者
回复 wangyashuai 的帖子
# U4 W) t/ a* t- u& o, E! I( t( V; O
  `; {6 J, N( S& y, C就是直接加入3ml,手大力摇了几下,然后室温孵育10分钟,再次离心,就没有再看到那么多红色的沉淀了,只有像线那么薄薄的一层。

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发表于 2012-11-29 17:05 |只看该作者
回复 lipei77 的帖子
. M/ F: k* X) y1 K0 V
  d8 V  J' U3 n- N我也放的是四度啊

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发表于 2012-11-30 09:08 |只看该作者
回复 sunflower636 的帖子/ T: f+ H' H% G. L+ G; Y0 i. X
6 `. `, b: H$ `; s/ p" L" m
ACK就是红细胞裂解液,是我们自己配的。。。
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发表于 2012-11-30 17:28 |只看该作者
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回复 莫邪小仙 的帖子5 O( o5 `4 e: B- K
+ _' }7 C! K: z8 I
哦,这样的。效果怎么样?可否透露一下配法啊?今天和实验室的同学讨论了,他说我没有终止消化,但是我一直都没有终止消化,因为以前看到过说加血清根本不能起到终止消化的作用。或者说我真的消化过度了??
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发表于 2012-11-30 17:28 |只看该作者
回复 莫邪小仙 的帖子( [4 |. @7 |" Y7 y
5 P# q3 g1 f0 P( ]) V
哦,这样的。效果怎么样?可否透露一下配法啊?今天和实验室的同学讨论了,他说我没有终止消化,但是我一直都没有终止消化,因为以前看到过说加血清根本不能起到终止消化的作用。或者说我真的消化过度了??

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发表于 2012-12-3 09:08 |只看该作者
回复 sunflower636 的帖子
. G- J5 _& T! M; j4 d- T$ ^
, K$ H  f* C8 `  Q2 f氯化铵 8.29g 碳酸氢钾1.0g EDTA2钠 37.2mg 加三蒸水800ml 用1N的盐酸调节PH至7.2 ,补足三蒸水至1000ml,然后用0.22微米过滤器过滤楚军,室温储存。
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发表于 2012-12-3 09:16 |只看该作者
你那裂解时间是不是太长了。我们这用超纯水裂解大概也就30S,你还裂了10分钟。
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发表于 2012-12-3 09:16 |只看该作者
回复 sunflower636 的帖子$ y& J# z! n5 e
. t8 @- n) b. z# h' Z. @' ^6 \- I
收集细胞的时候没有终止消化?血清中含有抗蛋白酶成分,一般都是用胰蛋白酶消化细胞,正好中和了,怎么会起不到终止消化的作用呢?这样说来,也有可能是消化过度了,造成细胞状态不好了,也会有碎片形成的。
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发表于 2012-12-3 21:41 |只看该作者
回复 deshenglll 的帖子' }+ i. K# p/ |+ A

; I4 a; U* g( v5 [4 W# U说明书说的要裂解10分钟,可能因为我们的试剂不一样吧。
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发表于 2012-12-3 21:43 |只看该作者
回复 莫邪小仙 的帖子
9 b7 T/ M9 ?% b; b2 e
* Y; y. k3 C, {6 Y  D) q你是拿胰酶来终止胶原酶的消化作用?
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