红细胞裂解液会把干细胞裂解了么？

sunflower636

  昨天的试验过程中，离心后发现“红色沉淀”很多，怀疑应该是红细胞，心想这样吹打成细胞悬液肯定影响干细胞的生长，故加入了红细胞裂解液，37度，10分钟孵育，然后离心，但是今天看不到细胞。不知道是怎么回事，其他步骤和以前一样的，唯一不同是加了红细胞裂解液，难道红细胞裂解液会裂解干细胞吗？？

莫邪小仙

回复 sunflower636 的帖子- y; g0 O, t, p, P. d
7 M% X  G6 A+ x) y! K/ M% [8 A
我们用ACK裂解是在冰上进行的。。。

bloodroses

红细胞裂解液是针对红细胞膜的特性裂解红细胞的，虽然对白细胞有些影响，但也应该不会完全裂掉干细胞的。; ?. s7 u2 ]8 ~9 P3 \- U
可能是离心洗涤时，干细胞损失掉了。
6 D3 m; w8 Q) V1 l+ y; I, H可以考虑“先裂解后离心”或者“二步离心”，个人建议，仅供参考。

dudumao17

怎么会呀！应该不会没有的呢！即使裂解时间超级长或者离心超级高速，细胞可能会变成碎片，不会没有的。

wangyashuai

红细胞有电负性，渗透脆性(通常是一些非酶细胞裂解液的突破点)  ，悬浮稳定性，这都是区别于其他种类细胞的区别点.红细胞裂解液就是利用这些特性裂解红细胞的。另外红细胞裂解液不能达到 100%  准确的裂解红细胞，总会或多或少导致其他种类细胞的裂解。
, [3 j  v( J2 K, |. w0 E细胞裂解液中含可以攻击特定红细胞表面抗原的酶的时候就只会造成红细胞的变形，生物通道扩大膨胀裂解，或者引起红细胞的变性。而不会攻击其他细胞。
1 }( e1 ^8 r3 n 你的红细胞裂解液用的是哪种方法？
* m: ~; t7 G3 ~. U( o6 h! L

lipei77

不会裂解其他细胞，但会影响其他细胞的活性，我记得我们以前是在四度放置的

sunflower636

回复 莫邪小仙 的帖子7 Y7 L  P, F1 D

3 W9 V4 H# H2 F& @7 P?没有用过这种方法，ACK贵吗？

sunflower636

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& S( R7 r4 z! C+ J8 a
$ p9 V* O3 I: N  \- @5 m/ r( S! q离心后都沉淀下来了，怎么会没有了呢？

sunflower636

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5 P" E+ t2 s0 R* \. e! f  _3 s
4 \' G2 L. E9 w" u* b. o但是真的没有啊。能看到有贴壁的，但是接近圆形，不是梭形的。后面就根本看不到细胞形状了，像是碎片之类的东西。我之前养细胞都很顺利的，所以有没有细胞贴壁一眼就能看出来的。

sunflower636

回复 dudumao17 的帖子6 y1 o- `4 N' q5 {* l6 p' z* h, q% K$ k
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但是真的没有啊。能看到有贴壁的，但是接近圆形，不是梭形的。后面就根本看不到细胞形状了，像是碎片之类的东西。我之前养细胞都很顺利的，所以有没有细胞贴壁一眼就能看出来的。