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楼主: sunflower636
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红细胞裂解液会把干细胞裂解了么?   [复制链接]

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发表于 2012-11-29 17:05 |只看该作者
回复 wangyashuai 的帖子1 X3 [* F5 h" \! s7 b+ `

, m7 Z  b7 J+ f8 L1 ]就是直接加入3ml,手大力摇了几下,然后室温孵育10分钟,再次离心,就没有再看到那么多红色的沉淀了,只有像线那么薄薄的一层。

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发表于 2012-11-29 17:05 |只看该作者
回复 lipei77 的帖子
4 P- ~: R& y& b% @( f8 |4 x  k0 W0 u- r) e
我也放的是四度啊

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发表于 2012-11-30 09:08 |只看该作者
回复 sunflower636 的帖子! D# X- C( e6 D: g8 u

/ z' w( y: A6 I. TACK就是红细胞裂解液,是我们自己配的。。。
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发表于 2012-11-30 17:28 |只看该作者
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回复 莫邪小仙 的帖子# l9 H( Q5 I7 G

1 a" o& J; F9 I8 L0 \1 w哦,这样的。效果怎么样?可否透露一下配法啊?今天和实验室的同学讨论了,他说我没有终止消化,但是我一直都没有终止消化,因为以前看到过说加血清根本不能起到终止消化的作用。或者说我真的消化过度了??
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发表于 2012-11-30 17:28 |只看该作者
回复 莫邪小仙 的帖子+ E% }/ |! d' d

2 L( {+ `& Z, ~! p0 K) i: J: V哦,这样的。效果怎么样?可否透露一下配法啊?今天和实验室的同学讨论了,他说我没有终止消化,但是我一直都没有终止消化,因为以前看到过说加血清根本不能起到终止消化的作用。或者说我真的消化过度了??

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发表于 2012-12-3 09:08 |只看该作者
回复 sunflower636 的帖子
  i2 g) h/ ]: m) c5 R: h: V) b( n9 j7 Q! e2 T9 m& @& ~
氯化铵 8.29g 碳酸氢钾1.0g EDTA2钠 37.2mg 加三蒸水800ml 用1N的盐酸调节PH至7.2 ,补足三蒸水至1000ml,然后用0.22微米过滤器过滤楚军,室温储存。
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发表于 2012-12-3 09:16 |只看该作者
你那裂解时间是不是太长了。我们这用超纯水裂解大概也就30S,你还裂了10分钟。
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发表于 2012-12-3 09:16 |只看该作者
回复 sunflower636 的帖子( F' N* Z& n5 s% b
8 u$ M! {6 h0 ~
收集细胞的时候没有终止消化?血清中含有抗蛋白酶成分,一般都是用胰蛋白酶消化细胞,正好中和了,怎么会起不到终止消化的作用呢?这样说来,也有可能是消化过度了,造成细胞状态不好了,也会有碎片形成的。
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发表于 2012-12-3 21:41 |只看该作者
回复 deshenglll 的帖子
8 |7 Y  A2 l5 P% d1 E5 [7 w( A4 X/ Q) i* N
说明书说的要裂解10分钟,可能因为我们的试剂不一样吧。
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发表于 2012-12-3 21:43 |只看该作者
回复 莫邪小仙 的帖子
7 l, a0 j, E1 q* W( W; I% [& x0 D2 i+ U3 F5 I$ G8 a. x4 N1 X
你是拿胰酶来终止胶原酶的消化作用?
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