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楼主: sunflower636
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红细胞裂解液会把干细胞裂解了么?   [复制链接]

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发表于 2012-11-29 17:05 |只看该作者
回复 wangyashuai 的帖子
; m1 j; m& O7 [, f' m* C, d; |( @8 r, W( O, J4 j
就是直接加入3ml,手大力摇了几下,然后室温孵育10分钟,再次离心,就没有再看到那么多红色的沉淀了,只有像线那么薄薄的一层。

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发表于 2012-11-29 17:05 |只看该作者
回复 lipei77 的帖子' p3 D  _- B2 J+ x; Y' O! U: \
. h  ^5 a0 Q6 q7 r/ R7 |
我也放的是四度啊

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发表于 2012-11-30 09:08 |只看该作者
回复 sunflower636 的帖子
* A. |# P, O; A; b( P( S1 l8 u% q$ T+ f* {# S1 `5 a
ACK就是红细胞裂解液,是我们自己配的。。。
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发表于 2012-11-30 17:28 |只看该作者
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回复 莫邪小仙 的帖子8 j" {$ J' _% J; D
/ L& L7 E; x0 g! n! t
哦,这样的。效果怎么样?可否透露一下配法啊?今天和实验室的同学讨论了,他说我没有终止消化,但是我一直都没有终止消化,因为以前看到过说加血清根本不能起到终止消化的作用。或者说我真的消化过度了??
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发表于 2012-11-30 17:28 |只看该作者
回复 莫邪小仙 的帖子
1 `$ p) M% \. X6 I4 [* p) G' D, @) p& Q# ?/ W
哦,这样的。效果怎么样?可否透露一下配法啊?今天和实验室的同学讨论了,他说我没有终止消化,但是我一直都没有终止消化,因为以前看到过说加血清根本不能起到终止消化的作用。或者说我真的消化过度了??

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发表于 2012-12-3 09:08 |只看该作者
回复 sunflower636 的帖子5 u) p$ A7 g. y$ k4 F5 l2 c: N

0 |  M/ \0 a- F; W2 x" B; I氯化铵 8.29g 碳酸氢钾1.0g EDTA2钠 37.2mg 加三蒸水800ml 用1N的盐酸调节PH至7.2 ,补足三蒸水至1000ml,然后用0.22微米过滤器过滤楚军,室温储存。
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发表于 2012-12-3 09:16 |只看该作者
你那裂解时间是不是太长了。我们这用超纯水裂解大概也就30S,你还裂了10分钟。
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发表于 2012-12-3 09:16 |只看该作者
回复 sunflower636 的帖子; e3 f8 c& }) _5 q, b
) Q. w, o) m  p; e) `, U  j
收集细胞的时候没有终止消化?血清中含有抗蛋白酶成分,一般都是用胰蛋白酶消化细胞,正好中和了,怎么会起不到终止消化的作用呢?这样说来,也有可能是消化过度了,造成细胞状态不好了,也会有碎片形成的。
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发表于 2012-12-3 21:41 |只看该作者
回复 deshenglll 的帖子. s" t% V) Y( f7 b% c( E: H/ e
4 n9 k3 N% Z$ a) _0 g3 n0 `  ^1 H
说明书说的要裂解10分钟,可能因为我们的试剂不一样吧。
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发表于 2012-12-3 21:43 |只看该作者
回复 莫邪小仙 的帖子1 R3 q) f& N* e& ?* }6 R

0 }; f2 o% m+ u$ o4 `9 M6 j你是拿胰酶来终止胶原酶的消化作用?
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