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楼主: sunflower636
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红细胞裂解液会把干细胞裂解了么?   [复制链接]

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发表于 2012-11-29 17:05 |只看该作者
回复 wangyashuai 的帖子
6 T" c0 B8 b2 C6 ^  A( l& s* [3 J. q( ]7 @; T
就是直接加入3ml,手大力摇了几下,然后室温孵育10分钟,再次离心,就没有再看到那么多红色的沉淀了,只有像线那么薄薄的一层。

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发表于 2012-11-29 17:05 |只看该作者
回复 lipei77 的帖子+ l& ^6 l+ j5 L6 b, r

* Z; ~2 Z7 {0 x1 t, t我也放的是四度啊

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发表于 2012-11-30 09:08 |只看该作者
回复 sunflower636 的帖子
4 o: b3 a+ s% K+ A5 f& Y! D  d' n0 C$ k
# i8 ~5 k/ J+ [" p- M' x7 pACK就是红细胞裂解液,是我们自己配的。。。
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发表于 2012-11-30 17:28 |只看该作者
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回复 莫邪小仙 的帖子4 y0 P: r9 h4 ~8 V4 y' O# J$ U3 c- m
4 y9 o& C; ~' V1 ]3 T- k
哦,这样的。效果怎么样?可否透露一下配法啊?今天和实验室的同学讨论了,他说我没有终止消化,但是我一直都没有终止消化,因为以前看到过说加血清根本不能起到终止消化的作用。或者说我真的消化过度了??
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发表于 2012-11-30 17:28 |只看该作者
回复 莫邪小仙 的帖子
( }! R' S9 g& ?4 ^3 i) {. f, H: C% g: `5 f; [
哦,这样的。效果怎么样?可否透露一下配法啊?今天和实验室的同学讨论了,他说我没有终止消化,但是我一直都没有终止消化,因为以前看到过说加血清根本不能起到终止消化的作用。或者说我真的消化过度了??

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发表于 2012-12-3 09:08 |只看该作者
回复 sunflower636 的帖子
+ h( K4 |( G( P# i+ O0 ~. J! z% e- q& X& o
氯化铵 8.29g 碳酸氢钾1.0g EDTA2钠 37.2mg 加三蒸水800ml 用1N的盐酸调节PH至7.2 ,补足三蒸水至1000ml,然后用0.22微米过滤器过滤楚军,室温储存。
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发表于 2012-12-3 09:16 |只看该作者
你那裂解时间是不是太长了。我们这用超纯水裂解大概也就30S,你还裂了10分钟。
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发表于 2012-12-3 09:16 |只看该作者
回复 sunflower636 的帖子: c/ j' D+ b  l/ d6 r

* U: R7 A( |& G- l收集细胞的时候没有终止消化?血清中含有抗蛋白酶成分,一般都是用胰蛋白酶消化细胞,正好中和了,怎么会起不到终止消化的作用呢?这样说来,也有可能是消化过度了,造成细胞状态不好了,也会有碎片形成的。
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发表于 2012-12-3 21:41 |只看该作者
回复 deshenglll 的帖子
; Q1 C' i) P: `) W% j: a  P& s
* H/ T8 \% j' f, \# R说明书说的要裂解10分钟,可能因为我们的试剂不一样吧。
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发表于 2012-12-3 21:43 |只看该作者
回复 莫邪小仙 的帖子" O- B9 M3 r' n( {) f' r8 X
% T( q, ]) `( i0 a7 _6 t( f
你是拿胰酶来终止胶原酶的消化作用?
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