eBioscience CD3单抗配制

yanlu98

请问谁用过eBioscience CD3单抗 货号是14-0039，请问是用什么溶解的啊？

cochongg

用1xPBS溶解，单抗是球蛋白，有重链和轻链，两者靠二硫键连接，长期存放在4摄氏度二硫键打开，抗体就降解了。
- q- |9 V1 M! ZPBS能使抗体处于一个缓冲体系当中，相对于用DD水溶解要存放的旧。
- D" R2 `4 @0 ?; L: G2 z. J& Z溶解时要注意，溶解成高浓度母液，分装小管，-20摄氏度保存，用的时候解冻，最好一次用完，4摄氏度存放不要大于2周，略有降解，

yanlu98

回复 cochongg 的帖子
0 Z1 Z; C8 n+ Z, D7 M1 M2 g" y; ~* u! f
请问我用细胞室用PBS可以吗？是KCL 0.2g，KH2PO4 0.2g，NACL 8.0g，NA2HPO4 2.16g配成1000ml，这种PBS可以吗？

yanlu98

回复 cochongg 的帖子
7 e: ?( j' S7 x# `7 _3 n+ V! ~/ h" Z3 X0 |! e
知道了 谢谢！

cochongg

回复 yanlu98 的帖子) c' d4 ~3 U) T5 ^- C! H8 N/ \/ L
/ V, Q% V" g1 m( m; \. f, u
要无菌的pbs会好一点，最好是0.22um过滤啦~\(≧▽≦)/~啦啦啦
* [5 _( E3 M. h. D' V1mg或者2mg溶解到1ml的pbs里面，50uL每管，分装20管。。。。。用的时候多方便啊
! |+ Z$ K- \7 i+ w0 H( y) h

dahui

eBioscience这个14-0039的全称是Anti-Human CD3 Purified，一共有两个包装25ug和100ug。但是出厂浓度都是0.5mg/ml，厂家推荐染色体系是：0.25ug/100ul/105E~10E8cell，但是厂家推荐的量一般都较大，因为他要保证你有充足的抗体可以与你的目标分子结合，所以他推荐的量一般不要超量，除非您的细胞量很大，体系很大。您问的这种情况，我不知道您是要稀释分装保存，还是正式试验过程中需要同时操作多个样品，而稀释抗体来染色，一般不建议对原厂的东西进行稀释保存，而是在试验过程中稀释成工作浓度来现配现用，用灭菌的PBS稀释就可以。

yanlu98

回复 dahui 的帖子) H7 W2 e4 L( l! S( a! N

, @# d: _% ]+ ^5 r/ m' ]. j谢谢！

echono

cochongg兄：用1xPBS溶解，单抗是球蛋白，有重链和轻链，两者靠二硫键连接，长期存放在4摄氏度二硫键打开，抗体就降解了。PBS能使抗体处于一个缓冲体系当中，相对于用DD水溶解要存放的。
7 y9 k+ P: A2 M/ s5 \6 B4 d  h  j0 {# @# a( Z0 L
对于这个原理按道理是没错，但有个疑问：为什么像那些市面上用的球蛋白反而要求4度保存，冻存后反而不能使用？太困惑了。不都是球蛋白

细胞海洋

回复 echono 的帖子
' F9 G8 F& _% {) D! W7 L3 W5 p/ A: e$ G2 l& x
你回复谁 就点击对方回复帖子中的回复按钮 然后输入内容 像我这样
, C3 M5 M. V1 p& _9 x: |. ^; X( _. m; R, W
否则他会看不到

细胞海洋

回复 cochongg 的帖子; c0 G( m7 ~+ a1 X4 L$ t

! \" S, j( Q3 g, f, n! q请看8楼