eBioscience CD3单抗配制

yanlu98

请问谁用过eBioscience CD3单抗 货号是14-0039，请问是用什么溶解的啊？

cochongg

用1xPBS溶解，单抗是球蛋白，有重链和轻链，两者靠二硫键连接，长期存放在4摄氏度二硫键打开，抗体就降解了。, Z% e3 l# f; u# N/ s
PBS能使抗体处于一个缓冲体系当中，相对于用DD水溶解要存放的旧。! c* T) `% L: O0 S0 L" |7 i
溶解时要注意，溶解成高浓度母液，分装小管，-20摄氏度保存，用的时候解冻，最好一次用完，4摄氏度存放不要大于2周，略有降解，

yanlu98

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6 `8 r$ F0 [4 Z$ W8 y6 G( d; V# O请问我用细胞室用PBS可以吗？是KCL 0.2g，KH2PO4 0.2g，NACL 8.0g，NA2HPO4 2.16g配成1000ml，这种PBS可以吗？

yanlu98

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2 l$ Y. x5 `( w' s4 m知道了 谢谢！

cochongg

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7 L& F1 T7 A( |6 J
, L6 @. K8 Q) P1 E7 D3 B要无菌的pbs会好一点，最好是0.22um过滤啦~\(≧▽≦)/~啦啦啦+ Q5 c* G+ e, i" g8 g
1mg或者2mg溶解到1ml的pbs里面，50uL每管，分装20管。。。。。用的时候多方便啊2 _: n9 S7 P  c4 F# O5 R

dahui

eBioscience这个14-0039的全称是Anti-Human CD3 Purified，一共有两个包装25ug和100ug。但是出厂浓度都是0.5mg/ml，厂家推荐染色体系是：0.25ug/100ul/105E~10E8cell，但是厂家推荐的量一般都较大，因为他要保证你有充足的抗体可以与你的目标分子结合，所以他推荐的量一般不要超量，除非您的细胞量很大，体系很大。您问的这种情况，我不知道您是要稀释分装保存，还是正式试验过程中需要同时操作多个样品，而稀释抗体来染色，一般不建议对原厂的东西进行稀释保存，而是在试验过程中稀释成工作浓度来现配现用，用灭菌的PBS稀释就可以。

yanlu98

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1 j" I/ S6 W8 ]. x, m& ~
. E2 @. [7 R9 r3 w  o$ q9 b谢谢！

echono

cochongg兄：用1xPBS溶解，单抗是球蛋白，有重链和轻链，两者靠二硫键连接，长期存放在4摄氏度二硫键打开，抗体就降解了。PBS能使抗体处于一个缓冲体系当中，相对于用DD水溶解要存放的。! d4 A" e* T7 g  N0 ~: |

* ?# B4 z! Q. i, F  U9 ^对于这个原理按道理是没错，但有个疑问：为什么像那些市面上用的球蛋白反而要求4度保存，冻存后反而不能使用？太困惑了。不都是球蛋白

细胞海洋

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: ^3 S7 _7 u$ U8 k( A" o% B, B- I5 D  Q+ u4 s
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; `9 Z) T* i+ F+ t( |否则他会看不到

细胞海洋

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请看8楼