培养CIK细胞贴壁了

daifenghao

最近在培养CIK时遇到一个问题：抽取癌症病人自体血，用T淋巴细胞分离液分离单个核细胞，诱导培养CIK，48h后，出现细胞几乎都贴壁了，请问这是怎么回事？

流泪的鱼

是DC前体细胞，未成熟的！

tianangelt

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) F( b  Z7 i  n& H5 g可能是DC细胞或者巨噬细胞。

lyj-0017

回复 流泪的鱼 的帖子) g3 `: A( X$ X# g1 p6 `! y: l
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人家他说的是诱导培养CIK，那应该是用贴壁处理2小时之后的悬浮细胞进行诱导吧？贴壁处理就是为了去除掉单核、巨噬和DC的嘛

lyj-0017

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# z$ [8 }, B& c2 @; g请问，你分离出单个核细胞之后，
. k- d) o2 I! P9 j1、单个核细胞经贴壁处理2小时后，取出悬浮细胞，同时添加细胞因子诱导CIK？
; D' {2 v. D1 ?1 ?% o, x; W; f7 B还是
1 i0 U% h: _+ H6 w7 ?6 y/ M2 S, [2、单个核细胞直接加入培养瓶，同时添加细胞因子诱导CIK？

daifenghao

回复 lyj-0017 的帖子$ h! f- X/ F8 x; k( G5 A# W
3 E$ k2 z3 u! ^) E- N* A, W3 S9 i
分瓶了，贴壁细胞和悬浮细胞分瓶培养，悬浮细胞诱导CIK，48H后观察出现几乎贴壁，但是再72H后观察发现贴壁几乎全部自行脱落，聚成细胞集落，培养液也变黄了并补液了，貌似一切又正常了，今天观察一切挺好！

daifenghao

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5 K6 p+ T3 b& }" H1 X
4 H* b& D# A# e2 ~2 m5 N! J我都是种下6个小时后分瓶悬浮细胞诱导CIK

wf78365421

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2 `6 K* ]3 |2 H贴壁的是DC

wf78365421

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6 J$ G. R6 V6 l5 H
! `2 @, I  J9 G' b! H贴壁的诱导DC，不贴壁的诱导CIK。+ t8 V" Y3 V  @; t

momoenn

如果不弃去贴壁细胞，而是等它自己悬浮，会不会对CIK 的纯度产生影响呢？