培养CIK细胞贴壁了

daifenghao

最近在培养CIK时遇到一个问题：抽取癌症病人自体血，用T淋巴细胞分离液分离单个核细胞，诱导培养CIK，48h后，出现细胞几乎都贴壁了，请问这是怎么回事？

流泪的鱼

是DC前体细胞，未成熟的！

tianangelt

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8 ~# L3 y* c% b; v. i& p# C
8 F! Z" w9 Q4 \7 Z$ h  M# }% l- @可能是DC细胞或者巨噬细胞。

lyj-0017

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' G% E4 X8 ]3 I, M. O; ~
人家他说的是诱导培养CIK，那应该是用贴壁处理2小时之后的悬浮细胞进行诱导吧？贴壁处理就是为了去除掉单核、巨噬和DC的嘛

lyj-0017

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3 D5 g8 P% a6 S/ t: R. Y6 _
请问，你分离出单个核细胞之后，7 n! e% |& N) ~
1、单个核细胞经贴壁处理2小时后，取出悬浮细胞，同时添加细胞因子诱导CIK？" e: n! Y: T8 ^' k. S* V( B
还是2 W9 M4 l) t3 v* P, a9 w8 C- D
2、单个核细胞直接加入培养瓶，同时添加细胞因子诱导CIK？

daifenghao

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分瓶了，贴壁细胞和悬浮细胞分瓶培养，悬浮细胞诱导CIK，48H后观察出现几乎贴壁，但是再72H后观察发现贴壁几乎全部自行脱落，聚成细胞集落，培养液也变黄了并补液了，貌似一切又正常了，今天观察一切挺好！

daifenghao

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6 V4 n5 P' I1 m1 @- t  l6 T: c1 v& o! k1 ]/ Z( @4 o
我都是种下6个小时后分瓶悬浮细胞诱导CIK

wf78365421

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" e+ s. c3 c1 ]5 R7 ?
: c$ U( `% z; b2 g/ ^) Q! ~贴壁的是DC

wf78365421

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. I4 q( ?( _5 ]4 a: ?% L3 s贴壁的诱导DC，不贴壁的诱导CIK。. x0 ?) z- W8 b  j* x4 |/ _

momoenn

如果不弃去贴壁细胞，而是等它自己悬浮，会不会对CIK 的纯度产生影响呢？