培养CIK细胞贴壁了

daifenghao

最近在培养CIK时遇到一个问题：抽取癌症病人自体血，用T淋巴细胞分离液分离单个核细胞，诱导培养CIK，48h后，出现细胞几乎都贴壁了，请问这是怎么回事？

流泪的鱼

是DC前体细胞，未成熟的！

tianangelt

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/ B' \9 J& ]! e7 v5 T可能是DC细胞或者巨噬细胞。

lyj-0017

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3 u0 T9 f( o2 T( m$ w7 d
) R. i3 ?) _* S人家他说的是诱导培养CIK，那应该是用贴壁处理2小时之后的悬浮细胞进行诱导吧？贴壁处理就是为了去除掉单核、巨噬和DC的嘛

lyj-0017

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$ o$ D+ C2 A4 C
2 ~" U  S+ b+ h9 C) m请问，你分离出单个核细胞之后，$ |) t2 u+ s% M  S3 _) X
1、单个核细胞经贴壁处理2小时后，取出悬浮细胞，同时添加细胞因子诱导CIK？1 I5 h7 h% W* @- k: ^+ F# h
还是
, F+ e+ R0 d- Z1 h5 V- T- T2、单个核细胞直接加入培养瓶，同时添加细胞因子诱导CIK？

daifenghao

回复 lyj-0017 的帖子4 Y& k" U, x# J
3 l! v' p# V* o" N
分瓶了，贴壁细胞和悬浮细胞分瓶培养，悬浮细胞诱导CIK，48H后观察出现几乎贴壁，但是再72H后观察发现贴壁几乎全部自行脱落，聚成细胞集落，培养液也变黄了并补液了，貌似一切又正常了，今天观察一切挺好！

daifenghao

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5 K# u, D8 v  ?' A' v
  V$ Z3 q  p7 o" E7 F# `我都是种下6个小时后分瓶悬浮细胞诱导CIK

wf78365421

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" ~) _7 d/ H8 P. f
! k# b, n1 o0 }+ Z8 J% `贴壁的是DC

wf78365421

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- L0 ?3 H- ]- I' m, N. w( S2 P) J0 D$ _% X7 O
贴壁的诱导DC，不贴壁的诱导CIK。+ E8 q$ Z* ?; k0 L, ~5 [9 f

momoenn

如果不弃去贴壁细胞，而是等它自己悬浮，会不会对CIK 的纯度产生影响呢？