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1125476931 发表于 2017-1-16 14:47 $ F% d$ n! r* L, N
求推荐一种神经干细胞培养基,目前实验室用的培养基细胞长势一般,细胞酶解后离心洗涤,用培养基重悬会出现 ...
1 p6 h& I6 T0 R5 N' u7 ]- t$ F请问你使用胰酶进行细胞消化的吗? O o" S/ A. n. m6 F Y# N+ w$ u
& |. e' p* z3 P6 f5 G就你描述的情况来看,感觉像是消化的稍微有些过,导致有些细胞里的DNA释放出来形成了絮状物质。解决方法有两个:0 L" q# s6 ^; ~ w: m- c' G. g
1. 如果科研经费不成经费,建议考虑换成Accutase进行细胞消化。
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* _2 F6 \; R0 P2 j# S. s2. 可以考虑在消化液中加入DNA酶(具体浓度我忘记了,你可以查一下资料),这样可以消除絮状物l了。5 R3 d8 V" ^& m2 k
还有如果是用胰酶消化的话,消化时间不宜太长,消化后吹打不要力量太大。
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0 V; x& L ~& h6 j+ a- Y& d此外,神经干细胞不是非要通过酶消化法传代,机械吹打也可以用来进行传代,只是单细胞率不会太高。你可以根据你下游实验的需要,来选择传代方式。
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有问题多多交流。 |
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