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go

求推荐神经干细胞培养基或者因子 [复制链接]

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包包
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楼主
发表于 2017-1-16 14:47 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
求推荐一种神经干细胞培养基,目前实验室用的培养基细胞长势一般,细胞酶解后离心洗涤,用培养基重悬会出现絮状物质,拿枪头吹也吹不散,三天后培养基中会出现絮状物质,絮状物之中有大量神经干细胞球,目前想换一种培养基对照一下,酶解的酶目前是用的TryplE
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专家 优秀会员 金话筒 新闻小组成员

沙发
发表于 2017-1-20 00:11 |只看该作者
1125476931 发表于 2017-1-16 14:47 $ F% d$ n! r* L, N
求推荐一种神经干细胞培养基,目前实验室用的培养基细胞长势一般,细胞酶解后离心洗涤,用培养基重悬会出现 ...

1 p6 h& I6 T0 R5 N' u7 ]- t$ F请问你使用胰酶进行细胞消化的吗?  O  o" S/ A. n. m6 F  Y# N+ w$ u

& |. e' p* z3 P6 f5 G就你描述的情况来看,感觉像是消化的稍微有些过,导致有些细胞里的DNA释放出来形成了絮状物质。解决方法有两个:0 L" q# s6 ^; ~  w: m- c' G. g
1. 如果科研经费不成经费,建议考虑换成Accutase进行细胞消化。
& W9 ?& x, @: F& _, ]8 C6 v
* _2 F6 \; R0 P2 j# S. s2. 可以考虑在消化液中加入DNA酶(具体浓度我忘记了,你可以查一下资料),这样可以消除絮状物l了。5 R3 d8 V" ^& m2 k
    还有如果是用胰酶消化的话,消化时间不宜太长,消化后吹打不要力量太大。
2 P& X! o9 G7 F1 T/ l
0 V; x& L  ~& h6 j+ a- Y& d此外,神经干细胞不是非要通过酶消化法传代,机械吹打也可以用来进行传代,只是单细胞率不会太高。你可以根据你下游实验的需要,来选择传代方式。
0 h5 y$ E2 L: r" a" r+ R1 D7 T; v2 H+ z
有问题多多交流。
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藤椅
发表于 2017-3-22 11:04 |只看该作者
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& G, G5 c8 Q$ N; G1 U1 f% B$ ~7 [7 q- k, L1 f  E% N9 ]- s) c
我用的accutase。不过也会有絮状物。机械吹打把握不好力度,每次消化后单个细胞总是长不大了,然后就分化了。
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板凳
发表于 2017-3-22 11:07 |只看该作者
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/ E$ K- T& O4 w: }1 ~: j8 o* N# C. P  z6 z+ Y% O
用STEM PRO ACCUTASE对细胞伤害会小一些。
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