小鼠胚胎成纤维细胞冻存

zhbshi998

恩，不错

deron

美女研究员的待遇真好~

loveL85

呜呜 我自己提的原代MEF冻存仅一个月，在复苏的效果超差的 存活率几乎为0  我的冻存液是70%DMEM+20%FBS+10%DMSO
8 G7 H& }) M) e4℃1h -——负20℃2h——负80℃过夜——液氮  U7 E, U& ~: R( Y- z
是我冻存液的原因呢 还是降温过程的原因啊？  a$ s, `- j5 H( V2 z
就因为这样 导致每次都要重新交配老鼠进行提原代细胞

jinyiran

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4 H4 F1 ?7 K. b( ~4 i" _- S. b! u+ p0 \3 |
你冻存前的细胞有部分培养过吗？确定细胞状态本身是没有问题的吗？你试着提高血清的浓度，看看会不会好一些。降温的过程和我们以前的一样，不过推荐你可以使用冻存盒，那个很方便。

jinyiran

我们一般是4度30min,负20度，1～2小时，然后转入负80度过夜，第二天转入液氮中。不过现在一般都直接用冻存盒了，那个比较方便，不过一般用几次后要记得更换异丙醇，不然会影响细胞冻存质量。