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TetO-慢病毒表达系统的包装质粒是什么?   [复制链接]

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楼主
发表于 2012-11-11 17:19 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
本帖最后由 细胞海洋 于 2012-11-11 17:35 编辑
& V7 p. F% X6 Q% g5 \% R' T. @; h0 i% H4 M2 {% O6 o8 D7 V
请问有做TetO-慢病毒诱导iPSCs的吗?& o0 l" [- I- _

+ l1 |1 s9 C6 O  H  R! |0 e3 FProtocol中:For each 10-cm plate, use 10 μg of FUW-tetO-cDNA (Oct4, Sox2, Klf4 or c-Myc) lentivirus backbone with 2.5ug of pMD-G and 7.5 μg of pPax2.4 f$ ^- E. b3 _) |2 S+ g- G- ]# a
问题1:里面的包装质粒:pPax2是“Plasmid 35002: Pax2”还是“Plasmid 12260: psPAX2“?两者有什么区别啊?附图:
# G; w9 I2 D. f3 f6 |9 p; w7 q0 r以下图片点击可以放大( I" Z4 d0 x. O" @

/ v1 c# V3 V6 g1 I: E7 O" c问题2:而另外一种包装质粒pMD-G指的是”Plasmid 12259: pMD2.G“吗?附图:1 q/ }* l; |% M) k6 u
: g' V% m: E6 P2 c: n5 t
pMD-G与pMD2.G有什么区别吗?
' X+ e5 e8 `/ \0 n1 n$ O( d  l' h# W7 S
问题3:这两种质粒都可以用于慢病毒的包装吗?有没有什么影响啊?
/ Z8 m7 l# v6 r6 \, T. ~$ V
2 A3 M; r2 {0 p3 a问题4:还有一个质粒:Plasmid 20342: FUW-M2rtTA,这个对于四环素诱导也是必需的吗?也要一起包装吗?附图:% {, h! P$ A& W2 j5 e( t
. @& ?9 J9 ?2 Y  i- P% D

+ P  s7 `+ y' E& p  r3 A请知道的朋友帮解释一下。非常感谢!
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沙发
发表于 2013-3-1 09:45 |只看该作者
请问后来楼主用的是什么质粒,还有病毒都是购自哪个厂家?是有包装好的吗?我刚接触ips,希望指教,非常感谢。
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藤椅
发表于 2013-12-6 17:57 |只看该作者
小弟现在做p53对转化细胞代谢的影响,急求TET四环素诱导的wt-p53质粒,对接下来的实验非常重要,跪求论坛里的园友谁有这个质粒,可否赠小弟一点,不胜感激!
+ I* n9 O- Q. Z) `6 C2 D1 m. t人的或者大鼠的野生型p53都可以。
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