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TetO-慢病毒表达系统的包装质粒是什么?   [复制链接]

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优秀会员 金话筒

楼主
发表于 2012-11-11 17:19 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
本帖最后由 细胞海洋 于 2012-11-11 17:35 编辑 . V' H$ |$ N+ r% [$ K
7 H- G& C/ ]) p7 u% b' p1 \$ n0 B/ x
请问有做TetO-慢病毒诱导iPSCs的吗?
/ F/ b* D, `5 v6 Z+ A* Y
2 c: j8 D! o0 q2 U5 A' \- sProtocol中:For each 10-cm plate, use 10 μg of FUW-tetO-cDNA (Oct4, Sox2, Klf4 or c-Myc) lentivirus backbone with 2.5ug of pMD-G and 7.5 μg of pPax2.
! a+ P7 L* P- q3 N问题1:里面的包装质粒:pPax2是“Plasmid 35002: Pax2”还是“Plasmid 12260: psPAX2“?两者有什么区别啊?附图:
  s5 o' O& g  {) W以下图片点击可以放大
+ d5 T5 W) `* @: j  I
" W# r2 R/ ?9 y  E# ]问题2:而另外一种包装质粒pMD-G指的是”Plasmid 12259: pMD2.G“吗?附图:
! D2 L# T  f$ W- b6 {7 L$ B
( F* t+ @9 M3 j  {, B; x7 o- P- LpMD-G与pMD2.G有什么区别吗?
. C: B9 ^" i5 J, G8 u6 I) K8 K1 T: @% U0 |; }) u( l" `" |" z
问题3:这两种质粒都可以用于慢病毒的包装吗?有没有什么影响啊?
" O& L+ W. z3 [; d2 J& Z
) S( ?6 M5 z, {. ~! g# f% x问题4:还有一个质粒:Plasmid 20342: FUW-M2rtTA,这个对于四环素诱导也是必需的吗?也要一起包装吗?附图:
2 E; _$ R5 s8 J" r3 g( E# b: t5 ^- r) u6 K, Y5 w4 Q
6 o! D& Q9 W$ C1 {  e
请知道的朋友帮解释一下。非常感谢!
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沙发
发表于 2013-3-1 09:45 |只看该作者
请问后来楼主用的是什么质粒,还有病毒都是购自哪个厂家?是有包装好的吗?我刚接触ips,希望指教,非常感谢。
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藤椅
发表于 2013-12-6 17:57 |只看该作者
小弟现在做p53对转化细胞代谢的影响,急求TET四环素诱导的wt-p53质粒,对接下来的实验非常重要,跪求论坛里的园友谁有这个质粒,可否赠小弟一点,不胜感激!
- k; o0 g1 E5 H& X' z人的或者大鼠的野生型p53都可以。
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