诱导骨髓间充质干细胞向脂肪方向分化

richy

诱导分化
* g5 ^) i( G# I; O细胞以每毫升 5 ×104   ,接种于培养皿中 ,细胞达到 80 %汇合后更换成脂诱导培养液(L－DMEM 培养液 ,10 % FBS , 地塞米松 10-6mol/L , 胰岛素10  mg/L , 3-异丁基-1-甲基黄嘌呤（3-isobutyl-1-methylxanthine，IBMX 0.5 mmol/L ,吲哚美辛 0.2mmol/L),对照组继续加常规培养液 ,每 3 天换液一次。在诱导 6 、9 、12 、15 、18  d 时各取各组细胞进行油红 O 染色 ,光镜下观察并摄影。) i8 n1 F8 d( V7 J; b2 s4 ~

# S8 P  S6 D- o& ~油红O配方* E7 K9 b( J4 W9 T% j1 r  l( d
油红O1g,异丙醇100ml或70%酒精100 ml,将油红O放入烧瓶于水浴中加温溶解或放入温箱中60℃30min,用前过滤,临用时取油红O10ml,蒸馏水10ml,两者混合后立即变成鲜红色液体,静止30mi n后过滤使用.
+ L4 S* V- I* E1 V油红O染色
6 i; U) G* J5 Y7 t1 M! u$ t①固定于10%中性甲醛溶液内1～2d.
! k1 z# K3 x; T: J7 E" e②蒸馏水洗冰冻切片1 0～20μm入蒸馏水.4 d! q+ Q( X6 M5 S' E
③用70～80%异丙醇或酒精稍洗或用蒸馏水稍洗.
9 ^- c4 a' S) p' ]$ ]④入油红O 染色15～25min.9 `! y6 z% j/ g- T1 \6 D8 e
⑤入异丙醇或酒精或蒸馏水洗.
6 u6 U( I# w/ g" ]) t0 f⑥用苏木素淡染细胞核,充分水洗,用甘油明胶或用PVP封固.

dragon513

谢谢楼主分享哈

dragon513

我看到不同资料的MSC成脂分化条件有点差异，胰岛素、IBMX和DEX都用，最多浓度有点差异。但有的不加吲哚美辛，这个吲哚美辛在其中究竟发挥多大作用啊？

uuyuq

谢谢楼主,学习了。

franklinhg

missyoudad

谢谢

tnfsf10

谢谢。能不能发一些实验的图片看看？