诱导骨髓间充质干细胞向脂肪方向分化

richy

诱导分化% Q* s, K, E& R. c
细胞以每毫升 5 ×104   ,接种于培养皿中 ,细胞达到 80 %汇合后更换成脂诱导培养液(L－DMEM 培养液 ,10 % FBS , 地塞米松 10-6mol/L , 胰岛素10  mg/L , 3-异丁基-1-甲基黄嘌呤（3-isobutyl-1-methylxanthine，IBMX 0.5 mmol/L ,吲哚美辛 0.2mmol/L),对照组继续加常规培养液 ,每 3 天换液一次。在诱导 6 、9 、12 、15 、18  d 时各取各组细胞进行油红 O 染色 ,光镜下观察并摄影。6 n4 F. n) Q$ |- r( I0 o2 h  f- j

/ {0 d& ~  b5 z6 ^7 y8 ~油红O配方+ @. J+ M$ s* A
油红O1g,异丙醇100ml或70%酒精100 ml,将油红O放入烧瓶于水浴中加温溶解或放入温箱中60℃30min,用前过滤,临用时取油红O10ml,蒸馏水10ml,两者混合后立即变成鲜红色液体,静止30mi n后过滤使用.
! {  u* k4 ~5 L, _6 V6 U! _4 t, O8 b油红O染色
$ Q2 ^" ]4 U$ E% @①固定于10%中性甲醛溶液内1～2d.
& K/ [7 r/ w  k( ~②蒸馏水洗冰冻切片1 0～20μm入蒸馏水.
6 N" J4 V8 ], h③用70～80%异丙醇或酒精稍洗或用蒸馏水稍洗.2 s- d: ?  i) s3 |0 R
④入油红O 染色15～25min.
7 @8 {: m+ @% p⑤入异丙醇或酒精或蒸馏水洗.
) ?* y7 i! P% B' |: o1 P7 ]⑥用苏木素淡染细胞核,充分水洗,用甘油明胶或用PVP封固.

dragon513

谢谢楼主分享哈

dragon513

我看到不同资料的MSC成脂分化条件有点差异，胰岛素、IBMX和DEX都用，最多浓度有点差异。但有的不加吲哚美辛，这个吲哚美辛在其中究竟发挥多大作用啊？

uuyuq

谢谢楼主,学习了。

franklinhg

missyoudad

谢谢

tnfsf10

谢谢。能不能发一些实验的图片看看？