求助：如何使悬浮培养的EB贴壁？

yuyan

我们把想让获得的小鼠EB贴壁分化培养，& e; ^+ F4 J8 Q" N6 [. V
按照文献中的信息，用0.1%的明胶处理过细胞培养皿之后，将EB放入此培养皿中过夜培养。
: H5 o# |: ^, s第二天观察，贴壁很少，10%左右。另EB消化成单细胞之后，贴壁的效率也很低，还是有很多悬浮的细胞。* t5 N. r) }* J# ]

9 l9 J9 v# N) V请问各位，! Z7 t0 J5 _7 C- B: B( X3 }
有什么方法可以使EB贴壁效率高一些？
9 A, S6 h  P2 r0 a# G4 F. |" V谢谢！

梦想lab

为什么要使EB贴壁呢？

splinkerette

我们的没有问题，EB挺好贴壁的。虽然用的是0.2%的gelatin，但感觉这个应该影响不大的

梦想lab

对了，你的EB指的什么？拟胚体么？

yuyan

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, ^+ V" d- h! ~. `+ s  d/ P' D
4 S% a8 y% R/ s2 d9 @是的，拟胚体。是想让EB贴壁后，再加诱导液分化。

yuyan

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6 J! ]1 R4 o+ T8 e
" j8 i: O7 {7 h4 V: p我也试了0.5%的明胶，还是不行。% Z" {2 j* L2 f# m1 |$ U" V) ]- U
也许因为EB状态不好，会影响贴壁效果。

牙牙丫丫123

用0.1%的明胶铺基质，然后培养液换成KO的，你试一下
3 V: g" O7 Q" ^" A

yuyan

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9 n; k( S8 {3 J* S
; M/ P2 O) j: l谢谢啦，我试试看！

zpzp0312

看了楼上的回复，感觉这不是培养基质的问题* z: {4 {& k% Y: C+ }
应该是EB自身的问题- L- f# J0 T) O6 ]* H( c
楼主的EB是不是结构松散，表面不光滑，有死细胞附着？如果是这样就要优化EB制备方法了1 R5 t. H, X) K) H+ r! d5 g4 q
建议发个EB的图片

fespysok

如果拟胚体经悬滴悬浮的时间过长，内部已经出现空腔，那样也就不容易贴壁了。