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原代养4天就传代   [复制链接]

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楼主
发表于 2015-5-30 18:14 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
可是消化不顺利 很多没消下来 部分细胞甚至缩都不缩 & K+ ]1 c4 P, G, I# _
胰酶之前用着都还好啊6 d/ o, Z8 r4 q2 U9 f% |$ a6 x! C$ d
不会是细胞在加油长加油贴壁吧
' J: C, {4 X3 L2 j9 S前辈们怎么看?
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沙发
发表于 2015-5-30 22:13 |只看该作者
消化不好的话,先看看你的胰酶是不是在4度放的时间太长了影响消化效果。如果胰酶没问题,那你的细胞是不是除了MSC之外其他的杂细胞太多了?
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藤椅
发表于 2015-6-1 11:41 |只看该作者
是培养的什么细胞呢?

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板凳
发表于 2015-6-1 11:49 |只看该作者
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血清没有洗干净吗?按照平时的时间消化不行的话,就放培养箱半分钟吧。这样也下不来的细胞八成是杂细胞或老化摊开了的细胞吧
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报纸
发表于 2015-6-2 14:39 |只看该作者
回复 daviddow 的帖子
# o$ v6 [: l( Z* C; v, o& F# M
6 Y6 y# S0 h# ~; ]" M! q6 e; J* ?前辈 是MSC  3 s. m: T" o& u) R" l% w
今天消化 换了胰酶 感觉要好些了 但是很多细胞仍旧小不下来 我估计也就下不来了 不知道那是什么情况
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地板
发表于 2015-6-2 14:41 |只看该作者
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2 a) ~% e% n6 ~: a# I! p
  U0 F: m; M, o" J0 k. Z哦?杂细胞也会贴的那么紧吗?但是看形态就是MSC 就是下不来8 s+ P* z  K# g
另外老化摊开的细胞都会缩的 然后下来
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发表于 2015-6-2 14:43 |只看该作者
回复 夜光猫 的帖子
: Z& F! K: o, V9 f* n$ ?$ h8 Z! p. |- `  o6 C
前辈 你们会用老化摊开的细胞做后续实验么  
4 c1 ?4 _, {% ~% o/ E师兄师姐说对细胞不要太高要求 客观条件有限 大概还是能用
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发表于 2015-6-2 15:20 |只看该作者
胰酶时间长,失效
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金话筒 优秀会员

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发表于 2015-6-4 09:15 |只看该作者
回复 倒腾细胞 的帖子
! d: n6 n' g3 A, g6 y" h6 r# B8 o- K/ g* q: }  l
MSC应该很好消化啊,不该难消化。是不是你分离的时候掺杂了其他的细胞?如果这样,那些细胞是不用考虑的
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发表于 2015-6-4 10:52 |只看该作者
原代细胞的消化本身就比后面细胞传代时消化时间长一些,LZ加入胰酶后可以镜下观察消化情况,必要时可以拍打下培养瓶,根据镜下观察的情况终止消化就好。
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