胰酶消化问题

1195963542

胰酶消化时间过长，对以后细胞培养有什么影响？细胞会死么

yooung

胰酶分解细胞表面膜蛋白，消化时间过长，估计严重点会消死细胞，也可能导致以后细胞培养时细胞贴壁不紧。

baby00000003

试试看trypLE吧，据说是细胞在那里面泡上个半天都不会死

1195963542

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终止原理是什么呢？      可以直接用培养基终止消化？

baby00000003

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2 Y! d, P  [& p
: k6 M. U% {4 M3 w3 P: k无需终止，离心洗干净就ok了.....

1195963542

回复 baby00000003 的帖子4 F" j0 g) l8 ^$ u7 Y
2 m; O% {* a0 V
哦  亲  你们用过么  听着这么好呢 呵呵

baby00000003

回复 1195963542 的帖子2 l- V& }4 r1 W# e+ g8 M
& I5 M" C% l5 K' r
一直在用呀，不过没有故意的把细胞泡那么久过

1195963542

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: T8 ]* n* {* ~: Z
0 A7 S, h  I# p/ ^3 b8 Z/ s% }8 |4 ]$ t你们培养的是什么间充质干细胞呢，浓度是0.125%的么    时间控制在多长时间呢

tingting2113

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# {0 F7 S$ o" u& Q' i: j( ?1 M2 F; A. z
影响细胞活性和贴壁状态，严重的情况细胞会死亡的。我们消化都是需要终止的，直接用培养基终止消化进程。

小猪32

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7 n) U& C" f2 _% J- k5 C& h$ w/ H$ u) @& A& A- r8 L2 M9 t
胰酶消化时间过长会影响细胞贴壁，所以建议消化前将胰酶复温，加入胰酶后，镜检，若细胞皱缩，细胞间出现间隙，即可轻拍培养瓶，细胞会成流沙状滑落，加入完培，吹打即可