细胞消化问题

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脐带间充质干细胞，原代和P1培养过程中，有杂细胞，到P2代，虽然没有看到杂细胞，用胰酶消化4min，也只能消化下来40%~50%，这是怎么回事？

LVXUEYAN1101

一、消化之前先用PBS或生理盐水洗一遍，去除培养基中残留的血清6 e& D! X3 A% ]% w# a
二、胰酶37℃预热，消化也在37℃进行

免疫与细胞

不知道你的胰酶型号和浓度，确保有针对才行。另外，消化开始时放培养箱内孵育一下，中间摇晃一下再继续孵育。

晗晗

我前两天也遇到这种情况了.可能是细胞过密或者要分化.或者已经分化拉.还有就是胰酶浓度不够,或者胰酶放的时间长了,我的那个换个新配的胰酶就好啦.就可以清楚地看见细胞被消化下来啦

UlissesJR

1、消化细胞倒掉原培养基后用PBS或者生理盐水洗一遍，再加酶消化% ]0 h/ F/ W- o) A9 ?% m. B( s
2、要是懒得洗，直接加酶晃几下倒了，再加酶消化& s/ I% j% |! e
3、可以加酶后，把细胞放回培养箱中加速消化，1-2分钟后可见瓶底沙粒一样的东西，可终止消化进行下一步处理

abc2613130

我们都是提前预热胰酶，然后将培养瓶放入培养箱消化。。。再用生理盐水冲洗。会消化完全。

风倾颜

1.消化之前可以用生理盐水清洗掉残余培养基
/ K, D% \/ H( ^$ d: r8 Q2.用之前预热一下胰酶，可以提高消化效率" [) x+ k; R$ i% C% a. w) q3 m
3.37℃条件下进行消化

cyperus

回复 lgdx1234 的帖子4 C, p6 v8 t- {( b/ r( L% g; R% l% @/ q
9 h$ v! l* o& b* P" p
是的，你说的对。
( a. P7 k! C" F! y+ W* Z消化剥离细胞之前最好用胰酶洗一下细胞。动作要快，目的是去除培养基残留，培养基的血清成分能抑制胰酶的活性。所以用胰酶洗一下再剥离的话就会更容易使细胞脱离，均一性也好不会出现一块已经脱离，一块还有附着。5 }" v( I3 \: w

saliai2016

一是细胞密度过大，消化慢+ z2 g7 C4 c; M0 T
二是胰酶没提前预热，温度过低，影响其效率
' Q& Y5 u* Q" q  j' u5 ~  L三是加胰酶前没有清洗干净

大胖子阿哥

要么是因为酶时间长了，或者温度比较低。一般消化20S就差不多了吧  时间太长对细胞也不好。