细胞消化问题

fjq729587158

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* h# c5 P. e! Z5 n& }脐带间充质干细胞，原代和P1培养过程中，有杂细胞，到P2代，虽然没有看到杂细胞，用胰酶消化4min，也只能消化下来40%~50%，这是怎么回事？

yeshch

消化之前有没有用PBS清洗一下细胞（残余的培养基可能影响消化效率）；另一点，如果能够提前预热一下胰酶，消化效率会高很多

baby00000003

难道是长得太满，长出叠层了？

随时准备下线

1、使用胰酶传代前，未使用PBS洗去表面残余的，可能含有血清的培养基；# d+ U% G2 O6 n) f
2、胰酶没有复温到37℃在使用；* ?& X! h9 c4 ~
3、细胞密度大的情况下，尽量多加胰酶，放到37℃条件下，可加速消化。

晗晗

1.再用胰酶消化前没有用PBS洗细胞3 ?6 f8 z2 b+ m7 N$ M
2.胰酶用得太少啦

shuimiao327

细胞消化前，用PBS洗两次

lgdx1234

我最近倒是找到一个新的方法去消化不容易消化的细胞。先用胰酶洗一下，然后吸掉，再加入胰酶消化，很快就能掉下来。我不知道是为什么，但是目前没有对细胞造成损害。个人观点了。

枫之叶影

一、胰酶的浓度是否过低了
/ b/ i6 ~- Z# \. V8 K$ d0 G' G二、消化之前先用PBS或生理盐水洗细胞
  d9 `. J3 X& ^7 @0 P9 Q: x三、胰酶37℃复温，消化也在37℃进行
- ?1 N7 ~+ B  b5 l四、细胞是否过密或者已经分化

veda327

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我们也一直是这样操作的，先用少量胰酶洗一次，再加适量胰酶消化一段时间后弃之，然后可以放培养箱多消化一段时间，这样子细胞消化的会比较彻底！胰酶不加EDTA

myylovewp

消化前用PBS冲洗一遍，完全去除血清的影响。我只之前做的脐带间充质干细胞消化时间一分钟左右，可以轻轻的拍拍培养瓶，细胞几乎都下来了。