想请问胰酶消化细胞大概都是多长时间？这个度怎么把握？

caoyue

想请问胰酶消化细胞大概都是多长时间？这个度怎么把握？

奇幻雪蓝

米兰小镇

MSC我们是37℃消化（3-5min），显微镜下观察贴壁细胞形态变化，当贴壁msc胞质回缩，细胞间隙不断增大，细胞呈近球形同时有少量圆形细胞脱壁时，终止消化
2 K& B/ E1 M2 s. a4 o+ J

alex19901

现在这个天气的温度，你可以再显微镜下观察消化情况，纤维状细胞从壁上脱落，变圆即可，而且当绝大部分细胞脱落时，需要终止消化。

ltickp

具体消化时间根据胰酶类型和胰酶浓度而定，一般镜下观察大部分视野细胞近圆形，少量细胞漂浮；细胞较均匀的消化为单个细胞说明消化效果较好

15225119792

回复 caoyue 的帖子
  X# T# D! m' _+ j! Q- B! ^+ a" y
从加胰酶到加终止液，不超过3分钟，时间长了对细胞有影响

caoyue

回复 15225119792 的帖子
3 z/ _2 c! w, V1 V* n3 K
, {; T3 }6 d- g3 L8 ~( @第一天观察漂浮的细胞很多，是不是胰酶消化时间过长，还是没有震荡好。

caoyue

回复 alex19901 的帖子, F% G1 A3 k+ W! G

' @4 w# E" R2 `2 ~5 s% [  Q第一天观察时，贴壁细胞很少，漂浮的死细胞较多，是不是消化时间过长？还是没有摇晃均匀？

a1249471827

应该是消化时间长了，或者是胰酶浓度比较高，我们实验室用的胰酶是稀释1倍，即0.125%浓度的

a1249471827

回复 米兰小镇 的帖子/ H' U. e1 s+ N
. W+ [) [8 S; i
你好，你说的消化法我用过，这个时候在显微镜下仍有大量细胞在培养瓶上，吹打之后依然观察依然后细胞在培养瓶上，培养瓶上的细胞就不能要了，算做正常的损失，是吗？