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楼主: SVZ
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求助:新配置的培养液迅速变黄????   [复制链接]

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包包
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楼主
发表于 2010-7-5 11:26 |显示全部帖子 |倒序浏览 |打印
大家好,我最近在尝试做小鼠成体SVZ区的神经干细胞培养,在我配液过程中发现我的培养液在配置过程中迅速变黄,不知道这是怎么回事?
$ \2 q1 Z' x7 [8 k
2 v, B) v! ?* h6 e! `& T培养液的配方如下:. @- l4 O3 i# T# v8 Y1 B! p  W
DMEM/F12(50ml)+bFGF(1Oul)+EGF(10ul)+B27(1ML)+N2(0.5ML)+L-Glutamin(0.5ml)
; r' w( T2 _) O/ k  S9 E; p* s
1 T6 |& W. d( Y2 R除L-Glutamin外,其他都是invitrogen公司购买的。$ l! c# r7 U+ ^' F

2 @: Y  J& y' g' U" f; y基本上是东西一加进去就黄了。但是液体放置多天还一直很清亮,所以基本排除污染的可能。$ C: }4 K3 t2 d2 _/ N  _1 M
我后来发现我分装的N2(-20度保存)冻液的颜色很不均匀,白一块黄一块的,我起初怀疑是N2变质的原因,就不加N2又重新配了一次,可还是很快就变黄了。我估计是PH值发生改变了,不知道这是否正常。各位同道是否遇到过这种情况?该如何处理?恳请高手指点,谢谢!
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沙发
发表于 2010-7-5 21:30 |显示全部帖子
谢谢楼上朋友的指点!
7 O! S- L7 r# M, ~4 d$ O" R8 ]: [  i* n  Z, @* `: \
我在配制的过程中没有避光,因为几乎所有的试剂除DMEM/F12外,都没有专门要求避光,DMEM/F12有要求说避光,但是大家经常放到玻璃门的药品储藏柜经常见光,但还是很好用。1 e, T# r6 m# X$ A: F/ q
% A! {; [" L7 i0 F3 x, p
至于发黄的程度,黄得有点像很稀且清亮的蜂蜜,稍微透一点点红。我添加的细胞因子的稀释都是按照说明书来的,说明书中没有用乙酸溶解的特殊要求。
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藤椅
发表于 2010-7-6 13:22 |显示全部帖子
非常感谢,这下我心里就有谱了。: N: n9 E7 y! l
确实没有沉淀产生,也确实加在细胞培养皿中放到培养箱培养后会变红一些。但是4度保存的培养液一直是发黄的。
2 m2 v+ v- R0 v2 a# {* o因为是新手,不知道是否必须调PH值才可以用。现在我决定再培养一批细胞,看一下情况吧。
# ~' B7 h- }% ~) @4 n再次感谢!

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板凳
发表于 2010-7-13 13:16 |显示全部帖子
干细胞之家微信公众号
给大家汇报一下吧,培养液变黄,但是对我的后期细胞培养没有产生什么影响,多谢大家指点。
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报纸
发表于 2010-10-14 16:06 |显示全部帖子
回复 2# xiaojunhu1985
, ]: Z4 F+ K9 G) V$ |( v
$ ~+ u9 B# W( A& z
2 V, ~. r) e3 |( |$ N6 F    请问避光很重要吗?我见到的很多养细胞的配液时都不避光的
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