DC 如何收获

hhchen418

请问大家一个问题：树突状细胞培养7天后要收获，该采取哪种方法？是直接用PBS冲洗下来还是用胰酶消化后洗涤后收集？

tangyvhuang

细胞刮刀刮

hhchen418

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# G: H: [3 _& o: O
谢谢！

hhchen418

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' `: |2 L# _3 m& Z  P# @! Y6 `  r( A9 T4 ~+ Q# P2 }3 L" w
用细胞刮刀刮的话，会不会损伤细胞？

大少爷

4度盐水冲洗

花饶然

这个主要看你们采用实验室采用的分离工艺是否已经稳定，看不到白膜层的几率一般是多大？这个与离心机，离心参数还有血液的个体差异都有一定关系。

细胞海洋

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4 u+ z6 @1 Z$ D0 e" Q
6 ?$ }, u2 i# I8 _; [: ~建议你发新帖提问

yangwy028

胰酶确实作用不起来。物理的方法确实可以试试

yxwfly

大致是以下步骤：
" I" A: W& h  @9 i! a把培养液吸出
0 P" p) K$ D$ X0 R6 G, `/ E7 g" B6 g→加入适量生理盐水（75cm²培养瓶10ml左右）' g) s) R/ ~1 |* y9 x
→把培养瓶平放，来回摇晃几下
  |$ o/ `0 {# s6 m! s$ t  @→吸出盐水，重复以上步骤清洗2-3次
2 h* U/ s: u( k  T- a→加入适量生理盐水6 f* `, ?% r& s
→用移液管来回吹打细胞，使细胞脱落
1 D0 w) W, D2 |5 `- B# s  ?→平放培养瓶，用力拍打，再吹打→显微镜下观察
7 d" C) f: Z  A. U→拍打，吹打，观察
& \$ g& k/ G/ j6 t1 e→细胞全部脱落→…………