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关于N2B27培养基德配置   [复制链接]

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楼主
发表于 2011-1-12 16:31 |显示全部帖子
to 随风的天使 :
4 ]( s0 G+ w# ^" p2 I1 ?. K4 l
! e' U( ?& c, z6 h: b& U     N2 (100x)  5ml/支, B27 (50x) 10ml/支, 直接加入到500ml的基础培养基里(比如,DMEM/F12)就可以了。+ j6 g& V7 K  K( |: u  J( h

* S( o3 z4 M! i1 ]$ d  C3 X     这样就是通常文献中所说的,1% N2 and 2% B27。) D" M6 J+ z: A7 v: |

3 l8 g5 x+ B+ I$ D     希望我说明白了。
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沙发
发表于 2011-1-13 17:24 |显示全部帖子
随风的天使 发表于 2011-1-13 09:36
2 \/ L  l6 ?( p  g5 P. `1 h* N2 b回复 深海寂寞鱼 的帖子
: O# u. F" T- }( Y! G# F$ {# E0 Y8 E& o6 d
谢谢你,我看很多文献还要加胰岛素等等很多东西,如果培养胚胎干细胞它只是临时的 ...
5 C+ ~) d2 O1 C" k* B" v
to 随风的天使:+ u1 A% L, C7 W' q

% g" s) ]+ \. B# @    B27和N2就是用来替代血清的。血清的成分十分复杂,而B27和N2的成份是完全清楚的。
! G" m* Q* S: o% W: L5 H+ Z) Q) y; x0 n
    有关B27和N2的具体成份,请你参看论坛里的这个帖子:http://www.stemcell8.cn/forum-vi ... 2B%B3%C9%B7%D6.html
- O* ~1 @; s- U! T
  y: W0 s7 _+ V6 {    这样你也就可以知道,其实B27和N2里面是有胰岛素的。
0 G7 X: x! X8 x$ C  Y' n
9 f$ h. D, p! R. C* [    我不知道你具体看的哪篇文献。你注意一下它是在加B27和N2以后又加了胰岛素吗?+ ?4 \" N) _* Y

) m- S3 b: m9 S5 O. T" L! u    如果是这样的话,那么它就是为了提高培养基里胰岛素的浓度。这样或许可以促进细胞的增殖。6 a8 @# d7 D4 w6 l

/ o" ?4 w; [) L& Z     当然也可能它是有选择性的加了B27里面的一些成份,所以加了胰岛素。
& H3 D; Y& e7 U1 }  e& A3 k% E) O6 A8 {' r2 j# t  g3 p% Z* ]
     多比较几篇文献,你或许就能发现规律。- s2 F. m; n9 H: x. {' P& U3 k

  F: |  K  g% s1 u     如果还有不明白的,欢迎继续讨论。
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藤椅
发表于 2011-1-15 22:57 |显示全部帖子
那你完全可以用他们实验室的配方。 Austin Smith的实验室的东西可信度很高。9 y0 D2 ]! C+ O; P/ R" v* g

9 Y9 {& E. F/ f- i! A- f% e你完全用Knockout DMEM/F12应该没问题。
- G+ F, Q  {9 q# V/ `; V( f# Q
% f" R% _" O* s0 G9 r$ ~) O4 n! ~' d你注意他把N2和B27的浓度减半了。. Q7 K# B$ O8 }4 L$ V9 V

' ?9 g+ [/ m" {4 ~我觉得你就按你的方法做。只要实验结果是好的。 你发文章的时候就按你的方法写就行了。
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