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求端粒长度检测方法   [复制链接]

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优秀会员 金话筒

楼主
发表于 2011-6-7 16:59 |显示全部帖子
端粒长度的测量方法:0 Q! Z* o8 I1 X
1、DNA印迹法(Southern blot, SB)
! `0 H2 k3 Q4 X7 E' M2、杂交保护分析法(hybridization protection assay,HPA)
/ m- A3 H" Z5 B/ A# E4 n+ |3、荧光原位杂交(FISH)
/ Y4 r) U0 K* ~( i( o+ U4、流式细胞计量-荧光原位杂交(Flow-FISH)+ f: u4 h2 F; C9 |4 O
5、寡核苷酸引物原位DNA合成法(PRINS)% ]; h1 D* ^0 ^: w( z6 n
6、定量PCR
: }# c2 I9 H: ]2 F7、单个端粒长度分析(STELA) 等。
7 J5 [* m- Y7 T1 \! C) m3 Q. b% S5 \' c+ W1 q3 }
总的来说,Southern blot是应用最广泛的方法, 但是针对不同的目的在测量端粒长度时还应有所选择;
: q" Y( O- G' u: h: F. }+ f- I流式荧光原位杂交(flow fluorescence in situ hy—bridization,Flow—FISH)是近年来发展的检测细胞端粒长度的新方法。该方法与经典的Southern印迹、定量荧光原位杂交比较,所需样品量小、细胞数少,可用于检测不分裂细胞、高通量细胞,操作快捷、灵敏度高、特异性强、重复性好,并且可区分并分析同一份标本中的不同细胞亚群,如不同免疫表型的细胞亚群,而避免预先的细胞分选过程。/ H7 J) S- I, y: V, L$ H

5 B4 @* b5 k+ ^0 c: {6 \具体区别详见文献:
' c/ l2 X) ~" a
8 e% B+ g2 b. y2 K/ ?8 I( y+ A
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