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本帖最后由 细胞海洋 于 2012-2-13 02:39 编辑 % z5 u; q5 A9 K5 ^' H! g
* R1 m! E5 b0 S) x0 Q- _" w
1. 价格:GE的percoll的价格比ficoll贵两到三倍。- x) x8 c! u# H, S5 y' f. u! h" [
3 K7 ~! y& ]6 j# L( X2 p2. 原理:isopycnical centrifugation. 即根据密度离心,将不同密度的物质分离开来。(而非根据大小的rate zonal centrifugation)" p7 r! J- p2 e; M5 x* \9 _, _
- h5 ^- l/ z4 _
3. 性质:
# k+ P: m* I" |# G+ a7 P: T7 v-ficoll: 所有的性质都是特别为外周血的单核细胞分离而优化过的。有1.084 ± 0.001 g/ml and 1.073 ± 0.001 g/ml, 1.077 g/ml三种.
* z# U( ]" J' f+ a5 y' a! |/ ~0 x" ?, _/ x3 K. d$ a+ U n
-Percoll: 有PVP-coated,而且性质特殊:在10000g以下,可以形成很广范围的discontinue gradient (from 1.004 to 1.080 g/ml);; t3 U: w( D6 W0 {7 Y
在10000g以上,能够沉降形成continue gradient. 范围如下:
0 \. _! [, i$ R" m3 B3 L6 @1.017 - 1.142 g/ml for Percoll in 0.15 M NaCl
+ `2 p$ o, X ?* k" C- J1.037 - 1.136 g/ml for Percoll in 0.25 M sucrose
- }, Z# b8 X0 ?' b7 r) H# f9 tpercoll还有一个优点,它不影响fluorescent activated cell sorting (FACS),所以做细胞分选很方便。
* ^& i, q: T: L* r& {2 ], r3 f& M% d0 N. t
4. 用途:. b$ A- V* I5 u: |$ B
- ficoll: 首先当然是从外周血中分离单核细胞。不过,同时也适用于脊髓干细胞的分离,骨髓干细胞的分离,也能用于颗粒细胞的分离。当然, 还有一些衍生用途,详见参考文献。
# y. e" z( l/ `
" G, a" I& C/ ?" S4 ~- Percoll: 用途广泛得多,可以自制特定密度的continuous gradient,特别为自己优化分离细胞的实验条件,而且直接可以上FACS分选细胞。由于其密度涵盖范围广,更多的应用在亚细胞结构的分离,病毒分离等。
" f0 d/ ]! A% u9 @2 F: ?
, w' s( O* J: @6 l! c参考:
Ficoll - Isolation of mononuclear cells- Methodology and applications.pdf
(874.22 KB)
Percoll - Cell Separation Media- Methodology and Applications.pdf
(1.07 MB)
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