为什么MSCs培养首次换液要半量换液?有什么意义？

mbpsky

我个人分析首次半量换液的原因：6 ~3 t3 i6 T' R! q9 f9 c
干细胞比其它细胞更脆弱，对环境的变化更为敏感，表现出来的现象就是不增殖、分化、老化、死亡等等。因此，每次换液尽量让这种变化体现的柔和一些。因P0细胞首次离体培养，对外界环境有一个从适应到依赖的过程，在首次换液前，细胞正在逐渐适应这种环境，并不断从培养基中吸收营养、排泄废物，慢慢地改变着这种环境，首次换液虽然在24h左右进行，看起来时间很短，但实际上细胞所处的环境已经与新鲜的培养基有很大差别了。
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5 t+ j! @1 S4 S不足之处或者不对之处请大家指正。

xiao6tao

另一方面原因有的细胞没有贴壁，全换液的话可能会把这部分细胞换掉，所以小部分换液！

bin

我一般是取材3天后全量换液，以后就是半量换液了，因为细胞在生长过程中会分泌一些可溶性因子，有利于细胞生长，全量换液的话，这些因子就被去除了。而且半量换液给细胞一个适应的过程，更加有利于细胞的生长。

黑眼豆豆

半量换液可以让细胞更好适应生长环境的改变，有利于细胞的贴壁。

jj2570782

防止细胞间信号的切断

柏林小杨

回复 bin 的帖子* M8 t3 w# d" h+ C# p

+ ]0 i* ?/ i$ i) U$ I: b% Z( I同意楼上观点。

open1230

半量换液的目的：" N" K. F: @, b) A- y# n
1、新分离的细胞由体内到体外，需要一个适应阶段，频繁的更换培养液会影响细胞生长。
$ Z! `% g9 y8 {  [2、部分细胞没有贴壁，变量换液既可以保持细胞的营养，又可以挽救没有贴壁的部分细胞。- S! k) h, Y% }/ r# x- D1 s7 S
3、原液中的部分细胞因子可能会对细胞生长起促进作用。

骨道边

是否我这两个月来我一直养不出来的原因吗？我一直没采用梯度分离法而是直接冲洗下来就培养的，有影响吗

hygene

骨道边 发表于 2011-5-2 21:48 : G. P+ `$ m' X+ C: C8 ?
是否我这两个月来我一直养不出来的原因吗？我一直没采用梯度分离法而是直接冲洗下来就培养的，有影响吗

+ M! i* e9 q% B+ u, v直接贴壁法培养对细胞损伤、损失更小，是很多实验室都采用的方法。可以参考本论坛帖子http://www.stemcell8.cn/thread-39263-1-1.html

Fish101

通过细胞计数法测得贴壁率，全骨髓培养法，及红细胞裂解法分离培养兔间充质干细胞，12h已经96%靠上的贴壁了。半数换液，是为了保留细胞分泌的生长因子对干细胞增殖的促进作用，同时也减少环境的改变对细胞的应激作用。建议48H，半量换液。