骨髓间充质干细胞直接贴壁法

Learner

我们实验室用直接贴壁法获得骨髓间充质干细胞，效果还不错。骨髓8-10ml 加入培养基HG-DMEM 10%FBS 20ml-30ml，如果用T75瓶培养，加30ML有些过多容易从瓶口溢出来我只加20ml。培养箱孵育三天不要动，也不用看（什么都看不见）。第四天换液加入新的培养基含有2ng/ml bFGF.就可以扩增。如果MSC数目够多9-10天就能长满。

ljs

骨髓间充质干细胞的纯度如何？

Learner

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还未检测！不过形态看起来挺好。

nibirucome

请问楼主“骨髓8-10ml”是怎么定量？

xiao6tao

我们也是直接骨髓贴壁培养法，简单。通过贴壁去除悬浮的杂细胞。我们是准备10ml的培养基，然后冲洗骨髓腔，在中植入培养皿中

Learner

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回复 nibirucome 的帖子* b  V# m% H. }  F7 a; Z
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这要看你每次抽骨髓的获得量，有时会得到8ml有时可得到10ml.

骨道边

是用高糖培养液吗？换液了之后就加bFGF会不会诱导细胞向其他细胞分化了，不能保持msc的性状啊

飞翔的十字架

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8-10ml的骨髓量？多少只老鼠啊·······

biotly

高糖培养基会不会让细胞分化啊，我用293生产的病毒上清空白对照也能让细胞分化啊~~~~

Learner

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bFGF的作用是维持其不分化特性，我也看很多文献用低糖，也有用高糖我两种都用过，感觉没太大差异。