求助：脂质体2000转染293t包装细胞制备逆转录病毒

linlicau

! ~+ J4 _9 n( ?3 _" @

# B( C$ A' |5 c- c! V; L; u# T4 u回复 如冰 的帖子
* g; h3 O6 r. H4 ?" e
# T, M6 i: Z2 U; ~7 @6 w+ y别加太多，6well板每个板加4-8微升足够了，细胞死一些也没关系，本来lipo对于细胞是由一定毒性的，只要你最后收的细胞够用就行。
8 Y" L* ^% \* I5 ^  e- I% }" k5 S" y4 d( J' ]4 m- L7 y
我用293FT，长得都很好的，也很好养，比干细胞容易多了，几乎不需要操心。

linlicau

回复 如冰 的帖子" I% A$ V; U9 D  z, D
  `, o! F1 z, f, n" B/ y
293FT就是fast的293T，一般1:3传代，就可以很容易的长到80%

linlicau

lili_19840516 发表于 2011-7-13 13:04
6 M& M6 _6 Q- S( m/ ]% E8 s! V那个脂质体2000的说明书上应该有推荐的细胞密度和脂质体的浓度，我觉得你脂质体可能加的优点多，按照说明书 ...

% Z, W: e) M" y. a& o1 L% C% F
估计可能细胞不同，加的量也有区别吧。
& ]  R% L- r/ g' m2 H% i% ^- T  s0 ^& K4 m
我们实验室用293FT，就是按照我上面说的那个量加的。一直都是这么做。6well做western，12well做qPCR.

linlicau

如冰 发表于 2011-7-14 08:53 , J( A# P2 M# k& M+ [
回复 linlicau 的帖子+ i" M1 i% b. w$ e

$ R# H7 A3 K4 q2 ^非常感谢您的回复，您实验室里用293FT包装过逆转录病毒吗？效果怎么样啊？是不是这个 ...

6 b: l! l) x- L/ I: \9 N
我们实验室使用慢病毒（Lentivirus），加油！

linlicau

回复 如冰 的帖子+ y8 v' x1 v: K/ C# k3 ?

$ Y" z8 t" u0 }+ a. E3 X共同努力！