关于细胞消化的相关实验操作

huangcong1988

消化时间要视细胞种类，胰酶量等等因素而定，如果细胞是那种贴壁比较紧的，那么消化时间要适当延长，如果细胞贴壁不好，那么消化时间就不要太长，因为胰酶消化时间太长对细胞有损伤，一般情况下消化时间为2~10min，胰酶用量也很关键，一般情况下500~1000微升就行，我养PK细胞，PK细胞比较经得起折腾，我就直接加1毫升，完了消化三分钟，之后再用力吹打，就能使细胞成为单个圆的细胞了，胰酶最好是分装到1.5ml离心管中，大约为0.5~1ml每管就行，用的时候拿一管，其余负20保存

huangcong1988

消化时间要视细胞种类，胰酶量等等因素而定，如果细胞是那种贴壁比较紧的，那么消化时间要适当延长，如果细胞贴壁不好，那么消化时间就不要太长，因为胰酶消化时间太长对细胞有损伤，一般情况下消化时间为2~10min，胰酶用量也很关键，一般情况下500~1000微升就行，我养PK细胞，PK细胞比较经得起折腾，我就直接加1毫升，完了消化三分钟，之后再用力吹打，就能使细胞成为单个圆的细胞了，胰酶最好是分装到1.5ml离心管中，大约为0.5~1ml每管就行，用的时候拿一管，其余负20保存

huangcong1988

FBS的作用应该是能中和胰酶，使之停止消化，还有就是消化完吹打的轻重，个人觉得要视细胞种类而定，如果细胞比较好养，就使劲吹打没问题，如果细胞比较娇贵，那就轻轻吹打