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1,含血清的培养基一定要洗干净: ]; L: p" h, p' F: A! J' E% o
2,配制或稀释胰酶无论用什么缓冲液都不能含钙镁离子 y9 @& E* Z- t c1 `
3,胰酶浓度根据细胞确定,用下限
3 b n8 z( E0 o4 E: Z" y' M2 A4,胰酶加进去轻轻摇匀覆盖细胞就行,不能提前吹或者拍打,如果细胞成片下来就不能弄散了
) C- i7 Q) a: m0 q5,刚开始做的时候可以在镜下观察,细胞变性后把瓶子立起来,不和胰酶继续接触,回台子终止
1 B8 d9 Y1 \ ~, X6,可以把胰酶吸走,加入培养基吹打分瓶,如果没有信心的话,终止血清用0.25%胰酶的5%就可以,可以直接吹打,但是最好不要吹起很多泡
2 N1 N: ` u. |7 n: X7,在胰酶浓度够的前提下,如果消化不好可以在37度孵育,上限是半小时
; c3 R* I1 a, F/ C1 w+ V) B2 Y8,胰酶要用进口的 |
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