求助切片免疫荧光染色----双染

biovictor

请问各位前辈：( _8 ~" w+ e; X. z5 n1 A2 z
      在下在做免疫荧光染色（双染）时，两种抗体只能染上一种，我怀疑是我的方法不对，我直接将两种一抗混在一起加在片子上，然后又将混好的二抗加在片子上。故我怀疑这样做是否可行！请各位帮帮忙了！多谢多谢。

biovictor

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7 A) h5 F5 w" Y5 L( u/ `! I& U( J, ~7 T8 g0 K5 N1 h
好的，非常感谢大家

biovictor

回复 yinjiqingqq 的帖子3 N* ~8 v3 a6 w( X" O

, j) W. x0 q( s" t. f: j4 }+ B多谢

biovictor

回复 juan880929 的帖子' I( \4 `+ e+ ~- [
  z1 k, x: V8 ^" T+ x) H+ C
多谢

biovictor

回复 echowdk 的帖子9 f& ]# T: M( }" m& i  @
8 p' R( o  G2 K7 {
多谢

jhu132llh

只要两种一抗和二抗都不会发生拮抗反应的话是理论上没问题的
# O) d% q+ B5 h; [9 E2 I5 K) z$ C! o只要浓度合适就可以的了
  g' Z9 Z' ?$ t' L/ J0 j你可以单染一下那个没染上的抗体看看就知道究竟是什么问题了
) F2 `+ H$ _7 Q做免疫荧光染色最好是有阴性对照
& L! P; l/ T5 g7 n3 k- p这样的结果比较科学可信的

yinjiqingqq

我觉得这种方法是可行的，补充楼上的，如果另一种抗体没有染色上，你可以对这种抗体单独做一次染色，并且最好做个阳性对照。

juan880929

可以试一下先加一种一抗再加另一种* s/ `/ {* Y! k; c

echowdk

回复 biovictor 的帖子0 }) E2 f, J/ Y" n0 m7 e" F
- c8 J5 q% W$ ^  H- q
只要两个一抗的来源不同，浓度合适的话，应该是可以的。我之前总是这么做，没遇上什么问题，效果也挺好的啊。