求助切片免疫荧光染色----双染

biovictor

请问各位前辈：/ m) J) _8 U6 P
      在下在做免疫荧光染色（双染）时，两种抗体只能染上一种，我怀疑是我的方法不对，我直接将两种一抗混在一起加在片子上，然后又将混好的二抗加在片子上。故我怀疑这样做是否可行！请各位帮帮忙了！多谢多谢。

echowdk

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只要两个一抗的来源不同，浓度合适的话，应该是可以的。我之前总是这么做，没遇上什么问题，效果也挺好的啊。

juan880929

可以试一下先加一种一抗再加另一种! ?4 X, d8 J8 }/ U8 z, J$ C6 j

yinjiqingqq

我觉得这种方法是可行的，补充楼上的，如果另一种抗体没有染色上，你可以对这种抗体单独做一次染色，并且最好做个阳性对照。

jhu132llh

只要两种一抗和二抗都不会发生拮抗反应的话是理论上没问题的
  t9 K5 ^6 @# g1 ~% P只要浓度合适就可以的了
/ g3 u9 ~# Q/ e8 b/ j' o. |$ G你可以单染一下那个没染上的抗体看看就知道究竟是什么问题了0 W( B# \$ {, m4 v% N& J1 J
做免疫荧光染色最好是有阴性对照0 w" h9 w9 C$ @) |. i" P$ i
这样的结果比较科学可信的

biovictor

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多谢

biovictor

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- p4 C; y* d) b8 H) i多谢

biovictor

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. u* W' D9 ^2 a. r$ s& g! u多谢

biovictor

回复 jhu132llh 的帖子) m0 |$ \% W8 U" ]) |/ Y

) P5 C9 O7 B: J7 v" K: H好的，非常感谢大家