求助切片免疫荧光染色----双染

biovictor

请问各位前辈：
9 z: x5 v# \1 [) Z; k8 C      在下在做免疫荧光染色（双染）时，两种抗体只能染上一种，我怀疑是我的方法不对，我直接将两种一抗混在一起加在片子上，然后又将混好的二抗加在片子上。故我怀疑这样做是否可行！请各位帮帮忙了！多谢多谢。

biovictor

回复 jhu132llh 的帖子) U/ B4 a' C5 _: i2 `: @! d

6 U/ A0 n" B! T' s  ~: [% H好的，非常感谢大家

biovictor

回复 yinjiqingqq 的帖子
8 o& R( O$ Y3 L( L  K
% m5 t8 R# b6 r6 ~多谢

biovictor

回复 juan880929 的帖子
( F& l; Y1 ~3 x% [2 I0 W
4 ~/ A1 _2 V8 @) h0 k$ @多谢

biovictor

回复 echowdk 的帖子) }2 q# o, [' K  Y, [: {0 j5 s/ |
# A4 S* }. |  n0 p+ h
多谢

jhu132llh

只要两种一抗和二抗都不会发生拮抗反应的话是理论上没问题的
! t4 h  ]& N8 x+ X, m8 b只要浓度合适就可以的了
6 H! K5 E3 \2 P/ R* g8 j你可以单染一下那个没染上的抗体看看就知道究竟是什么问题了- d, ~: e# R, P$ a
做免疫荧光染色最好是有阴性对照
; T# `, t, ^" a- U- V8 b% f2 H( u1 V这样的结果比较科学可信的

yinjiqingqq

我觉得这种方法是可行的，补充楼上的，如果另一种抗体没有染色上，你可以对这种抗体单独做一次染色，并且最好做个阳性对照。

juan880929

可以试一下先加一种一抗再加另一种; r% m2 J: o6 E0 i* S( ]

echowdk

回复 biovictor 的帖子7 ]& z0 X' C# X5 [5 ]: N

; I8 N6 @$ S+ O0 @7 _# O( _只要两个一抗的来源不同，浓度合适的话，应该是可以的。我之前总是这么做，没遇上什么问题，效果也挺好的啊。