求助切片免疫荧光染色----双染

biovictor

请问各位前辈：, s) `: e1 A8 R
      在下在做免疫荧光染色（双染）时，两种抗体只能染上一种，我怀疑是我的方法不对，我直接将两种一抗混在一起加在片子上，然后又将混好的二抗加在片子上。故我怀疑这样做是否可行！请各位帮帮忙了！多谢多谢。

echowdk

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0 a! o& u. _' n5 a$ Y) S" {8 h/ ~只要两个一抗的来源不同，浓度合适的话，应该是可以的。我之前总是这么做，没遇上什么问题，效果也挺好的啊。

juan880929

可以试一下先加一种一抗再加另一种
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yinjiqingqq

我觉得这种方法是可行的，补充楼上的，如果另一种抗体没有染色上，你可以对这种抗体单独做一次染色，并且最好做个阳性对照。

jhu132llh

只要两种一抗和二抗都不会发生拮抗反应的话是理论上没问题的
) s2 s( \9 |0 _5 o$ r只要浓度合适就可以的了& @( n8 f+ d# K- g- f7 L6 Z
你可以单染一下那个没染上的抗体看看就知道究竟是什么问题了
1 B3 X# M% ?. N: _# D, ]做免疫荧光染色最好是有阴性对照
$ L" C- B4 [; U5 l这样的结果比较科学可信的

biovictor

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多谢

biovictor

回复 juan880929 的帖子; ?1 e2 T) i+ z9 {3 u
+ ?7 C$ `) I+ `, s2 q
多谢

biovictor

回复 yinjiqingqq 的帖子2 D- P; G. r; I" Z- ?" d% k5 D! g

& y+ C6 K; k' ^; x) N/ ?, e多谢

biovictor

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好的，非常感谢大家