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[请教] 请教大家关于抗体稀释的问题   [复制链接]

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包包
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楼主
发表于 2011-9-21 23:13 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
本人最近刚接触组化实验,想咨询各位关于抗体稀释如何的问题,如有的抗体标注1:200稀释,到底稀释时如何来操作啊?是1µl抗体+200µlPBS来稀释吗?请教各位,另外抗体稀释的工作浓度如何来把握,稀释抗体是不是都是用PBS?稀释抗体的PBS如何配置啊?谢谢!
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沙发
发表于 2011-9-21 23:51 |只看该作者
好问题,谁若能解决这个重大问题,必然获得诺贝尔奖

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藤椅
发表于 2011-9-22 00:56 |只看该作者
抗体稀释液成分是3%~5%质量分数的BSA溶解于1*PBS中。PBS配法在你们实验室前人的实验记录和学位论文中有详细记载。
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板凳
发表于 2011-9-22 08:57 |只看该作者
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1:200就是1ul的抗体加在199ul的PBS中, T9 C8 y' a( t
抗体稀释液成分是1%~5%质量分数的BSA溶解于PBS中( L6 \! a8 O  h! x& d
就是1-5克BSA溶于100mlPBS中* S6 o4 n3 i2 G1 C% t6 j, x
PBS配方参照分子克隆实验指南上的配方
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报纸
发表于 2011-9-22 11:10 |只看该作者
我记得我的教授教我时,是1μl加入到200μl的PBS中,这是老一辈人的传统。PBS在中杉、迈新直接买粉末。加水溶了就可以用了。
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地板
发表于 2011-9-22 13:09 |只看该作者
谢谢楼上啊

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发表于 2011-9-23 09:47 |只看该作者
我们的一抗一般用1%的BSA稀释,这样封闭完了以后不用清洗就可以直接加一抗了
4 p' Z% P' d; a; W$ B; T0 P二抗一般用PBS稀释,清洗完了一抗直接加入二抗孵育了
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发表于 2011-9-23 10:36 |只看该作者
抗体稀释不一定非的用PBS,也可以用PBST,3-5%的牛奶,抗体稀释液等,这个要看你的目的和实验室的习惯了。
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发表于 2011-10-19 11:17 |只看该作者
有专门的抗体稀释液卖的。一抗稀释液,二抗稀释液。我们买的碧云天的
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发表于 2011-10-19 21:45 |只看该作者
回复 snickle 的帖子
* W! r6 p% _5 m( m: a5 B$ h7 x  [) [
也不光是PBS、PBST,生理盐水也可以的。
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