eBioscience CD3单抗配制

yanlu98

请问谁用过eBioscience CD3单抗 货号是14-0039，请问是用什么溶解的啊？

cochongg

用1xPBS溶解，单抗是球蛋白，有重链和轻链，两者靠二硫键连接，长期存放在4摄氏度二硫键打开，抗体就降解了。
& A8 N, l+ Z. S( r& RPBS能使抗体处于一个缓冲体系当中，相对于用DD水溶解要存放的旧。* a9 G6 w' H5 q& ]( Y/ ^2 @0 `
溶解时要注意，溶解成高浓度母液，分装小管，-20摄氏度保存，用的时候解冻，最好一次用完，4摄氏度存放不要大于2周，略有降解，

yanlu98

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# ^3 q+ @/ ]5 c+ k0 ~- {2 o3 K3 V/ `
请问我用细胞室用PBS可以吗？是KCL 0.2g，KH2PO4 0.2g，NACL 8.0g，NA2HPO4 2.16g配成1000ml，这种PBS可以吗？

yanlu98

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" q3 V" V& Y! {: H$ X$ O5 F知道了 谢谢！

cochongg

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9 M( H" u! h9 m0 L8 }要无菌的pbs会好一点，最好是0.22um过滤啦~\(≧▽≦)/~啦啦啦
/ c8 ]5 x9 i) v& f% ]1mg或者2mg溶解到1ml的pbs里面，50uL每管，分装20管。。。。。用的时候多方便啊
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dahui

eBioscience这个14-0039的全称是Anti-Human CD3 Purified，一共有两个包装25ug和100ug。但是出厂浓度都是0.5mg/ml，厂家推荐染色体系是：0.25ug/100ul/105E~10E8cell，但是厂家推荐的量一般都较大，因为他要保证你有充足的抗体可以与你的目标分子结合，所以他推荐的量一般不要超量，除非您的细胞量很大，体系很大。您问的这种情况，我不知道您是要稀释分装保存，还是正式试验过程中需要同时操作多个样品，而稀释抗体来染色，一般不建议对原厂的东西进行稀释保存，而是在试验过程中稀释成工作浓度来现配现用，用灭菌的PBS稀释就可以。

yanlu98

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6 |& }9 {" i5 E6 N谢谢！

echono

cochongg兄：用1xPBS溶解，单抗是球蛋白，有重链和轻链，两者靠二硫键连接，长期存放在4摄氏度二硫键打开，抗体就降解了。PBS能使抗体处于一个缓冲体系当中，相对于用DD水溶解要存放的。" k. i( U- S' [+ U7 Z' N8 f
! R& b7 f, F1 @2 n$ n7 _" ]9 N
对于这个原理按道理是没错，但有个疑问：为什么像那些市面上用的球蛋白反而要求4度保存，冻存后反而不能使用？太困惑了。不都是球蛋白

细胞海洋

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- T  X+ D/ M; A- B你回复谁 就点击对方回复帖子中的回复按钮 然后输入内容 像我这样5 ?2 F' m3 v% j+ @
: Z* z/ x8 b+ K9 X
否则他会看不到

细胞海洋

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' v. l# c4 L, _3 G/ b7 w& R请看8楼