荧光原位杂交（fish）探针设计原则和方法

weiyepan

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! Y" C& T! D4 w8 R0 N1 p$ k1 e7 ^如果楼主只是做体外培养的细胞的话，应该探针会好做一点，一般要求进细胞的片段长度是200~500bp，长度短了相对特异性会差点。但是你做mRNA的话，看你想做RNA探针还是DNA探针，感觉RNA探针会好用很多，背景会低点。
$ p& b# b3 h8 V/ m% K) U用RNA探针的好处就是转录效率高，得率也高，掺入比例比DNA探针要高，可以用RNAse H降低背景。缺点是容易降解，如果是现做现用，应该没问题，如果要保存超过两星期，那就有点麻烦了。
4 M- I- s2 G0 q上传一篇protocol，做RNA探针的，你把里面aa-UTP换成你要标的荧光UTP就行了。
  C" `! F- H! V standard protocol of T7 aa-RNA transcription.pdf (53.03 KB)

2012-7-16 21:30 上传

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