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本帖最后由 yuhaoze 于 2012-7-19 15:57 编辑 + T' }6 q' ]9 x) g+ U- X
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角膜缘(limbus)位于角膜与结膜的交汇处,环角膜一周,宽度约2mm,深度150-250μm,由8-12层细胞构成。角膜缘干细胞(limbal stem cells)是角膜上皮细胞的单能性干细胞,在维持上皮细胞更新、角膜的透明性和无血管状态等方面起着重要作用。
% @$ ^$ s+ q% G/ D许多先天性眼表疾病以及酸碱化学烧伤、长期不当佩戴角膜接触镜都有可能造成角膜缘干细胞缺失,临床上表现为角膜表面的结膜入侵,新生血管化和不透明。# [, W4 Z& z: A0 l0 q8 F( B4 W
近年来,日本京都府立医科大学的研究人员用自体口腔粘膜上皮细胞作为种子细胞,将体外建立起的组织工程口腔上皮移植到干细胞缺损的眼表,成功提高了上皮盲病人的视力和生活质量。在这里通过几篇文献,简单介绍他们的工作:
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1.2003年 IOVS IF:3.6 1 c( |; i8 A/ S2 V( W* x# I
《The Successful Culture and Autologous Transplantation of Rabbit Oral Mucosal Epithelial Cells on Amniotic Membrane》2 x# }2 M$ I7 m2 U, A7 u5 w
作者从兔子口腔中取出适当大小的口腔上皮层,经过消化获得单个游离细胞,将此细胞接种在以3T3为饲养层、以去上皮羊膜为载体的气液交界培养环境中,经过几周的培养,口腔上皮细胞分化成复层上皮。在此期间,将日本白兔的角膜缘干细胞以及角膜上皮细胞通过机械方法去除,进行自体口腔上皮细胞移植,在移植后第十天将兔子处死鉴定。+ r/ k# }' v' c1 X/ t
结果为口腔上皮细胞在眼表生存状况良好,实验眼无结膜入侵和新生血管化。这是世界上首次利用自体口腔上皮细胞作为种子细胞研究角膜缘缺损治疗的工作。
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2.2004年 Br J Ophthalmol IF:2.9
" I4 p9 N, U0 N% ]6 q! ~* l) A k8 \《Transplantation of cultivated autologous oral mucosal epithelial cells in patients with severe ocular surface disorders》
* H8 ~2 n' T) C8 X. C/ I研究人员首次将口腔上皮细胞治疗方法推向临床,并报道了短期治疗效果:他们用以去上皮羊膜为载体的组织工程口腔上皮,治疗3例Steven-Johnsons综合征,3例碱烧伤引起的角膜缘干细胞缺损病例。6位病人的眼表在平均为一年的跟踪观察期内,都保持了透明与无血管状态,视力也均得到了不同程度的改善。
1 J2 W. L4 I; W4 A0 S
% z# I, i% c& a0 z3.2004年 NEJM IF:53.2
' l. C: p2 ~' P2 t) Y7 ^《Corneal Reconstruction with Tissue- Engineered Cell Sheets Composed of Autologous Oral Mucosal Epithelium》4 M, C" A+ p3 U0 u) }/ y
他们将治疗方法做了改进,不再用羊膜作为载体,反而通过聚丙基丙烯酰胺温敏材料,制作了无载体支架的复层口腔上皮层,减少了手术时间并规避了缝线手术,在工艺上是一个很大的飞跃。凭借对四例角膜缘缺损病例的完美治疗,他们把临床结果发表在了影响因子50+的NEJM上:4位病人的眼表在平均为14个月的跟踪观察期内,都保持了透明与无血管状态,视力也均得到了不同程度的改善。
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! ]/ Z2 y( [* Y8 j; x3 q h1 L4.2011年 Br J Ophthalmol IF:2.9
, @; y! p+ f1 c) a9 E3 T' E《Long-term results of autologous cultivated oral mucosal epithelial transplantation in the scar phase of severe ocular surface disorders》6 K, ]- t2 {! I [% I8 T
口腔上皮细胞治疗角膜缘干细胞缺损的长期治疗结果。研究者对19例由不同原因导致的角膜干缺损病例进行了平均55个月的长期观察,结果令人非常满意:病人视力均得到了改善,眼表得以重建。
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5.台湾长庚大学医学院的研究者,自2004年以来也开展了围绕口腔上皮细胞治疗眼表疾病的临床试验和基础研究,这里有一篇关于口腔上皮细胞在眼表的命运的文章。: g) Q8 W3 H2 e- { A- U+ U
/ k# x! l R- H- E总结:+ c4 @- }0 o- }
以口腔黏膜上皮细胞为种子细胞,组织工程口腔上皮细胞治疗角膜缘干细胞缺损的( x& K- x }1 V" h7 G/ q l
优点:% G- ^! ]1 X5 @2 y! X, V4 Y* N
1、取材容易:从病人口腔中直接取得大量种子细胞! W4 y8 i/ j$ q9 v; T4 B7 ^& O. u; y
2、无免疫排斥,无需手术后免疫抑制治疗
7 Z% j% }8 v! d* F; C缺点:- F) _# I; b# a3 w
1、口腔黏膜上皮细胞在角膜上虽形成复层结构,但屏障作用不明显,无法像角膜上皮那样抵御外来物质侵害。: X$ `! U8 _3 F, {# i) U
2、角膜周边有新生血管侵入,但中央区角膜无血管,对视力影响不大# n( Y' c. F4 l9 u5 I0 P
3、口腔黏膜上皮细胞形成的多层没有角膜上皮的致密,规则,因此透光率小于角膜上皮细胞,容易发生光的折射和弥散。
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