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做脐带MSC时脐带粘丝状,什么原因?   [复制链接]

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包包
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楼主
发表于 2012-8-15 08:26 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
本帖最后由 huajie881026 于 2012-8-15 08:27 编辑
* P& G" H4 U& X# n' S1 f0 o
! U8 f1 T' A" B/ ?做了几次脐带原代MSC的分离,今天第一次碰到这种脐带:脐带拿回来3小时开始操作,脐带很粘,即使PBS反复冲洗三次还是很粘,有丝状物。
& j6 ]! y$ o3 @# |5 @$ u2 L  A5 v以前几次脐带都是有点脆脆的,刀划下去很有感觉,这次的却很粘,各位大侠有碰到过这种问题吗?这位产妇有妊娠糖尿病、胎儿出生前因胎窘剖宫产,会是这方面原因吗?
7 I0 G, N7 l1 ~% b- k这样的脐带对分离出MSC有影响吗?7 Q9 Z8 ^) a  u/ [% @8 j- g, \& g
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金话筒 优秀会员 帅哥研究员

沙发
发表于 2012-8-15 09:22 |只看该作者
本帖最后由 单个核细胞 于 2012-8-15 09:24 编辑 2 {' k5 u, t; `5 D0 W- Q8 s( ~! x
9 Y8 K0 v: r0 e3 v
回复 huajie881026 的帖子; Q. `: I& j; Y1 M; D' w
0 N. a0 K( O. R" `" e
这种情况正常,不会对分离产生影响。可以过一下75%乙醇消毒30s,会有很大改善。
# v$ a! d+ [8 B" s8 z9 x6 D6 _1 l4 g9 k( ^
另,从照片看楼主的实验物料还需清理干净,注意无菌操作。
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藤椅
发表于 2012-8-15 09:29 |只看该作者
从图上看这跟脐带水肿很厉害,这就是脐带粘的主要原因,但是对分离后培养没有太大的影响,估计原代细胞会碎片多一些。多换几次也就行了。" Z# [& g# e5 Z) t
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板凳
发表于 2012-8-15 09:31 |只看该作者
干细胞之家微信公众号
的确你的实验环境有很大的污染可能性。注意无菌操作啊。

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报纸
发表于 2012-8-15 09:37 |只看该作者
脐带水肿,细胞爬出受阻小,反而容易成功。
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地板
发表于 2012-8-15 13:06 |只看该作者
单个核细胞 发表于 2012-8-15 09:22 6 V" }2 m# e* O: ^& U% r9 _
回复 huajie881026 的帖子
  G7 R6 {* H8 U/ e( m5 _1 O$ b( ~) k+ ]! `/ L! ]8 n
这种情况正常,不会对分离产生影响。可以过一下75%乙醇消毒30s,会有很大改善 ...

1 h. C; d( t9 ~7 e, a( u9 r谢谢提醒,我们的原代超净台的确比较脏,以后会更加注意!

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发表于 2012-8-16 14:15 |只看该作者
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& r+ T, Y/ B/ ]6 b& [# N) X8 F0 O4 {9 T" N" A" Y
呵呵,你要是用过酶消化的方法就知道了,脐带里面很多多糖成分,所以会是这个样子!
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发表于 2012-8-17 00:28 |只看该作者
回复 透明之蓝 的帖子  x' J, i7 P1 ^5 h  i: z4 I$ e
$ I) l$ N- o, d; z$ P3 V3 G
消化法我的确做过,也的确很粘。不过不用消化法这么粘的还是第一次见
7 G9 o$ d3 ^8 ~# R酶消化法我做了一次没成功,所以没再尝试,你用酶消化法细胞量多吗?
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发表于 2012-8-17 23:00 |只看该作者
脐带粘  很正常的  对分离没什么影响    如果脐带不肿   可能还会比较好      但是你的操作环境很有问题
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发表于 2012-8-18 15:53 |只看该作者
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' a7 g! e. R  h* p2 N# a+ B
/ d2 V* B& `% z9 |# n呵呵,酶消化法,还得加上透明质酸酶,这样就不粘稠了~~8 _& w  {3 u  Z; `
你要是着急获取细胞,就酶消化,速度快;要是不着急,就可以用组织块贴壁的方法,一块组织块可以重复利用,收获的细胞更多!
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