配制mES培养基的方法

mayiwaiwai

培养基成分是，DMEM,10%FBS,100X NEAA,100X L-Glu,1000X 2-ME,1000X LIF,配制500ml的培养液，师兄的配方是：把除了LIF以外的东西混合，LIF用时直接加到培养皿中. M/ C9 \1 N1 V# _
50ml FBS + 5ml NEAA + 5ml L-Glu + 0.5ml 2-ME,再用DMEM补到500ml,还有人说是加50ml FBS ，再加450mlDMEM,然后再把其他的添加物按比例放进去，这两种方法哪个队呢，后者配制的培养液总体积不就超出500了么？

zpzp0312

用的快就不必考虑现用现加LIF了4 K' k9 b7 R4 @0 r* K
只要一周之内能用完，完全可以一次性配制好，4度保存就可以

jhu132llh

显然
1 I; t0 I+ _# o0 |理论上市要安第一种方法做的7 Y2 O& \6 _8 a# r! F7 N1 D6 `
因为这样出来的是最准确的体系, U( ]1 t# \+ N. r
然而2 G* y1 y: M1 I0 K
一般我们都比较懒，很少计算这么详细' s% b  d9 K  @: [% G9 ^
于是，我个人一般都是使用第2种方法
" \0 V" u% b- d一是因为这个计算量小，方便
+ s5 D! C- A1 o. m5 ^6 |* u, j二是因为其实这些添加剂对于浓度要求不是特别的精确，所以我们就忽略那个500ml中多10.5ml
( o1 T& G8 k2 ^5 q! A  N对浓度影响不大/ }8 \# W" @4 G" a
但是如果遇到对浓度要求特别精确的药物，还是要使用第1种方法