配制mES培养基的方法

mayiwaiwai

培养基成分是，DMEM,10%FBS,100X NEAA,100X L-Glu,1000X 2-ME,1000X LIF,配制500ml的培养液，师兄的配方是：把除了LIF以外的东西混合，LIF用时直接加到培养皿中6 t: A' D0 {7 H1 C5 i* _, G
50ml FBS + 5ml NEAA + 5ml L-Glu + 0.5ml 2-ME,再用DMEM补到500ml,还有人说是加50ml FBS ，再加450mlDMEM,然后再把其他的添加物按比例放进去，这两种方法哪个队呢，后者配制的培养液总体积不就超出500了么？

zpzp0312

用的快就不必考虑现用现加LIF了
) p* C: L' C- Q# {  e只要一周之内能用完，完全可以一次性配制好，4度保存就可以

jhu132llh

显然/ N* Y; a+ k4 s" b
理论上市要安第一种方法做的
$ U, R: `& G- S7 y& x& ]因为这样出来的是最准确的体系
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一般我们都比较懒，很少计算这么详细
0 C& ?, G  e* y, O5 P" E于是，我个人一般都是使用第2种方法
- ^0 ]1 }( j4 \, l, F3 O一是因为这个计算量小，方便
- C* m; t7 X  I/ w: \; Y+ {& n" l  H  ?二是因为其实这些添加剂对于浓度要求不是特别的精确，所以我们就忽略那个500ml中多10.5ml: `# `8 @3 u8 z, C
对浓度影响不大
1 e- h; Z  q$ B& O7 Y, W但是如果遇到对浓度要求特别精确的药物，还是要使用第1种方法