2i培养基

mayiwaiwai

有人用过这个培养基么，请问用这个还用加LIF吗，还有什么其他的特殊要求么（mouse ES ，无饲养层培养的）

genedu

回复 mayiwaiwai 的帖子$ g+ K. }& V# w7 Q* k
3 o" |. e2 Y8 n( W' x# ]. s5 [3 |
单是样小鼠ES的话，加不加ＬＩＦ影响不大，但是自我感觉加的话，质量会比较好。但是２ｉ体系下细胞容易飘，换液的时候要注意

生旦净末丑

不知道不加是什么效果 反正我们是都加

christophe

大家感觉家了2i以后，ES细胞长得慢吗？原来两天传代，现在得三天传代

mayiwaiwai

图是贴壁处理后的mESC细胞，无饲养层养在6孔板中，5x镜下的图片，想问这个密度能行吗，据说是小鼠炎细胞要密养，也有文献上说3,5的皿要在10的5次方这个数量级，+ _0 ?4 c2 H; u$ r
还有就是传代要每天传吗，因为这个细胞冻存之前是养在MEF饲养层的，所以在24小时的时候我贴壁处理一下的
1 E+ L6 A' P1 J! R/ h6 K

细胞海洋

回复 mayiwaiwai 的帖子4 `+ I' U+ p) I- l

: T1 X" _. h8 \3 W% J建议你发新帖提问

wbj1983

回复 christophe 的帖子- o8 B5 J& U" M* p
2 x) W, ^5 Q7 G$ T  @9 q& ?
有这个现象，这个可以理解的，加2i后细胞克隆相对比较典型，是往上生长，如果不加的话可能四个方向扩展生长，所以感觉上加2i后细胞长的慢，其实计数后发现细胞量少不了多少的！

wbj1983

回复 genedu 的帖子! F4 p7 [, ^) X
$ k* X8 F- D4 k! }
ES不加lif是不可以的，加2i更容易维持ES的全能状态，但是不加2i也完全可以维持ES全能性的！

christophe

回复 wbj1983 的帖子
3 x+ m$ u; U/ A" M2 _1 M* b) e1 G1 x* S! B& t7 v
谢谢你的回答，你说的有道理！

mayiwaiwai

回复 christophe 的帖子
  s) `3 o8 `' D" }% d+ ~
" Y$ t8 T) C+ s7 p4 O细胞长的慢，你觉得3天传代可以的么？我们实验室为防止它分化都是按照2天传一次，是不是过于频繁，细胞克隆长的不大呢