成软骨诱导阿利新蓝染色

huajie881026

8 C; z( o0 V4 L. M- w

5 @1 L. E3 d' g% N/ I. v前些日子自己试着做了成软骨诱导分化，5天左右细胞成一团，随着时间慢慢变大，诱导至满28天，细胞团直径约达2mm，团块较白，感觉上是诱导成功了。昨天石蜡包埋，然后切片、脱蜡、脱水后，阿利新蓝染色30min后，拍了照片（如下图），一些疑惑请教做过成软骨诱导的大侠：0 c. |& L! f- |- n/ o0 {; k: l
1、切片是不是厚了？昨天切的时候设置的是5um，但切下来的时候感觉厚了，有些地方有重叠；) v/ F; m! s! U& m2 l0 q9 S  z
2、阿利新蓝染的是粘多糖，应该是在外周部分还是中间部分？! z4 r$ N! Z: X8 D
100×
, I' b8 y0 F9 V, S0 I1 L
% ~! I( p4 B6 N; j1 I" Z200×  S$ p3 I4 z( A2 I. T

屋檐上的乌鸦

学习了。

winstonsee

软骨求一般看不到长吧，或者变小，我诱导得到的软骨球都很小；石蜡切片不顺利的话可以试试冰冻切片

农夫山泉nn

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6 I' ]2 H( Z& O/ L6 K
- G9 A3 K1 v8 a% c! a你好，时间有点久了不知道你还能看到这则消息不了，我软骨诱导的细胞也好小，不知道你最后怎么包埋切片的？最终染上色没有呢？

644414915

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2 a/ H3 Z& W( Y! |4 k3 ]: ?5 I" W
谢谢哈，开始没找到

tutufei

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: N1 G# d5 J3 f6 O
2 U: i" g& Q$ L4 F: A请问你用的阿利辛兰如何配的？pH?

ytumuyangren

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! G" t9 G$ y1 V% v+ D* B
8 Q. u7 C! D3 f3 Z3 V* m4 ^好的，谢谢你，我再试试，有问题再请教你！

huajie881026

回复 ytumuyangren 的帖子3 `& v9 c& [: j# D. F% H8 P) Y2 n
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一般pellet不会扶起来吧，形成球形后有软骨的乳白色的感觉，一般轻易不会散开，你再试试吧
0 q7 u4 m* l% x/ \7 h0 q7 f4 BPS：离心后三天不要去动它，三天后换液的时候基本感觉的到了

ytumuyangren

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# R- }* e# B4 R  {0 `
& ^2 l* z- X) j: q- L: i我已经做了快一个月了，每次都是前一天刚做好的pellet，第二天pellet上部有球状物，再过两天，球状物就崩解了，在往后就看到离心管底部一直是片状物，pellet没有浮起来的迹象，我再试试吧，不过还是要谢谢你！

huajie881026

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$ D/ b, q2 E0 T# N1 G  _/ v1 m; y- u. s, O) o
嗯 我也是这么做的  每次换液的时候要小心诱导基不要影响到pellet
, d& o2 C& D; J6 X你要不再试试