流式抗体可以做免疫组化吗？

huajie881026

买了BD的鉴定MSC的流式抗体，鉴定完了，现在将细胞打入动物模型，想做个免疫组化看一下细胞是否募集过去，请问我能用做流式的抗体吗？BD的这个抗体是直标的，能做吗？# o8 g3 B7 e1 S& T# {- R' S" h& f

86964109

直标的话信号会相对较弱吧，个人感觉还是别浪费了吧

sysuhoo

这个是可以做的，不过楼主的方法有问题。1 o2 I/ }3 x, O
按照你的思路是不能看外源MSC迁移的，最好的方法是用gfp标记外源msc后注入
, f5 |( f" s6 N9 v  X' i因为你的方法也能检测内源的msc，而且msc在各个组织都有2 B  j3 d1 j, g$ ]
个人意见，仅供参考

ljs

1.楼主做流式的抗体，如果做组织切片的话，应该是免疫荧光，而不是免疫组化。
5 ?) S6 C4 s% m2 S2 ^$ ^1 k8 @  x2.有的流式抗体可以做免疫荧光，有的不可以。而且对组织切片有要求，如固定方法，石切还是冰切，以及抗体的稀释倍数等。
- m+ a# J. Y4 N# B3 Q3.也是我个人的意见，不推荐这样做实验。8 v! Z  b# I. n) u
（1）首先楼主要看抗体的说明书，进口的流式抗体的说明书都有说明抗体的适用范围。, H( r9 R! g8 Y+ T& D. g
（2）流式抗体都是一抗标记荧光基团，如果做免疫荧光，没有二抗的扩大信号，很可能结果会出现假阴性。
+ v: d! i( D$ O3 I; F5 o; a4.总而言之，能否应用在免疫荧光，看抗体的说明书，如果说明书明确说明不能做其他的实验类型，就不能做。如果没有明确说说适用范围，楼主可以打电话给技术支持。

huajie881026

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) O$ ?1 ~. H& A+ G
! V/ T, A  ^/ J' u% X2 l谢谢指教！抗体说明书上是没有写免疫荧光这一项的，只写了FCM，也没有说能不能做免疫荧光之类的。
% ?( i" T" d/ C& |( D0 C+ w$ G再次感谢您的解答！

aidiulgy9517

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, Y/ F) d  `5 S# g. I
' `1 ~7 U8 L6 I; Q) ]3 q% L, Y可以在用荧光抗体免疫染色（流式分析）后将MSCs滴在玻片上，用荧光显微镜观察，看荧光信号是否足够强，然后再决定能否做免疫荧光组化。

yaolinzhang

回复 huajie881026 的帖子4 X6 J/ T' k2 a5 w) [3 P# `

4 ~4 |& d* ?* n1 L$ Z说明书上没写免疫组化，个人感觉好像不能用，楼主还是重新定购相关试剂吧

yubin083

只有一部分FACS用的荧光可以在免疫荧光镜下观看，这些在相关荧光谱上都有说明。另外你可以用抗一抗（直接法FACS）或抗二抗（间接法）抗体再次标记，就可以做免疫组化