流式抗体可以做免疫组化吗？

huajie881026

买了BD的鉴定MSC的流式抗体，鉴定完了，现在将细胞打入动物模型，想做个免疫组化看一下细胞是否募集过去，请问我能用做流式的抗体吗？BD的这个抗体是直标的，能做吗？" p7 b) e+ p. J: q! p" y* C

86964109

直标的话信号会相对较弱吧，个人感觉还是别浪费了吧

sysuhoo

这个是可以做的，不过楼主的方法有问题。
" g! h& Y+ }& b6 y7 q按照你的思路是不能看外源MSC迁移的，最好的方法是用gfp标记外源msc后注入
4 r- y7 f1 X* g+ o因为你的方法也能检测内源的msc，而且msc在各个组织都有
) H- e( u5 A9 E; ?; m) c1 I, u个人意见，仅供参考

ljs

1.楼主做流式的抗体，如果做组织切片的话，应该是免疫荧光，而不是免疫组化。
' |/ J/ q9 I/ f7 m' _! G0 `2.有的流式抗体可以做免疫荧光，有的不可以。而且对组织切片有要求，如固定方法，石切还是冰切，以及抗体的稀释倍数等。( z5 k* @( ~! t: C) q( ~* }
3.也是我个人的意见，不推荐这样做实验。* V$ b* `: D) u' E# j% x8 n/ b0 [6 h
（1）首先楼主要看抗体的说明书，进口的流式抗体的说明书都有说明抗体的适用范围。9 W2 H, j" M! _
（2）流式抗体都是一抗标记荧光基团，如果做免疫荧光，没有二抗的扩大信号，很可能结果会出现假阴性。& i1 M# x: V2 [; h+ J
4.总而言之，能否应用在免疫荧光，看抗体的说明书，如果说明书明确说明不能做其他的实验类型，就不能做。如果没有明确说说适用范围，楼主可以打电话给技术支持。

huajie881026

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谢谢指教！抗体说明书上是没有写免疫荧光这一项的，只写了FCM，也没有说能不能做免疫荧光之类的。
  v& t+ f+ c% P" d, N/ d再次感谢您的解答！

aidiulgy9517

回复 huajie881026 的帖子1 y3 i; v# ~; r
& A, ~9 L# L! {8 @1 f
可以在用荧光抗体免疫染色（流式分析）后将MSCs滴在玻片上，用荧光显微镜观察，看荧光信号是否足够强，然后再决定能否做免疫荧光组化。

yaolinzhang

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9 E/ u5 |( X/ E" D( t# _说明书上没写免疫组化，个人感觉好像不能用，楼主还是重新定购相关试剂吧

yubin083

只有一部分FACS用的荧光可以在免疫荧光镜下观看，这些在相关荧光谱上都有说明。另外你可以用抗一抗（直接法FACS）或抗二抗（间接法）抗体再次标记，就可以做免疫组化