请教大家：分选后细胞活力的问题

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请教大家：用流式分选之后，细胞数量少了非常多，而且细胞活力较差，大家有什么方法克服吗？

一枝独秀

细胞消化环节要注意，还有就是细胞缓冲液中要有保护细胞活性的成分，全称至冰上低温操作. x( D: a2 a1 Y. I

小飞雪2300

分选会流失很多细胞，细胞本身的状态就是分选的关键因素，分选对细胞的损伤其实蛮大，建议尽量降低分选速度缩短分选时间。

superlamp

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+ r- m( i! F& t( B
我也正想用磁珠呢，请问你是直接分选的还是先富集在分选的？什么marker？效率有多高？

jojo1988509

1.拿去分选的细胞状态要好，尽量多。2.分选前和分选后把流式管放在冰上。3.分选动作快。

细胞海洋

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yxhss

我是采用磁珠分选的，分选后阳性率可以，但死细胞较多，想问各位：1.分选说明书上说细胞离心采用300g,10min.大约2000rpm,我操作都在冰上，死细胞多是否是离心力太大，2.分选出来的细胞较多，一个实验又用不完，想问大家怎么养，以便第二天再做其他实验，是用原来的肿瘤细胞培养基，还是用无血清的肿瘤干细胞培养基，如果是后者，那就是用形成球状体的培养基，因此要用低粘附培养板。

我爱火热的冬天

要想用流失分选，细胞活性的降低是必然的，要再实验过程中注意每个细节，减少细胞的损失量，同时操作要快，作用过程要适时恰当，这是我的理解。

gact

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/ f! A# X/ m( O; v' A" h谢谢，学习了。。

zhangweihwz

流式分选时，细胞是带电的，所以会影响细胞活力。消化后的细胞悬液一直放在冰上，降低细胞的新陈代谢，会减少细胞细胞分选后的不佳状态。' B2 l6 r/ b" F6 M