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请教大家:分选后细胞活力的问题    

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包包
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发表于 2013-3-24 13:26 |显示全部帖子
请教大家:用流式分选之后,细胞数量少了非常多,而且细胞活力较差,大家有什么方法克服吗?
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金话筒 优秀会员 小小研究员 热心会员

发表于 2013-3-25 09:06 |显示全部帖子
我所能想到的就是尽可能的提高阳性率,增加细胞的贴壁率
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发表于 2013-3-25 09:59 |显示全部帖子
希瑞干细胞
回复 570505 的帖子# K& r2 m0 q" P6 I3 T
) `1 a4 r8 N9 Y# [3 ]% n
如果阳性率你不能提高的话,我个人觉得可以提高分选时的细胞量,在一个就是减少操作时间。
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优秀会员

发表于 2013-3-25 11:33 |显示全部帖子
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有些是分选过程中细节的注意吧,收集细胞的流式管加入培养基后,慢慢倾斜旋转,将管口用培养基浸湿,因为有很多分选后的细胞打到管口,操作尽快进行吧
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发表于 2013-3-25 23:25 |显示全部帖子
流式分选时,细胞是带电的,所以会影响细胞活力。消化后的细胞悬液一直放在冰上,降低细胞的新陈代谢,会减少细胞细胞分选后的不佳状态。( O; f) p' R' q3 W2 z
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金话筒 优秀会员

发表于 2013-3-29 08:46 |显示全部帖子
回复 zhangweihwz 的帖子
3 J+ A- Y: h" }  S" F' G
. I* L8 n/ Z; q4 P) G- T谢谢,学习了。。

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优秀会员 小小研究员

发表于 2013-3-31 17:56 |显示全部帖子
要想用流失分选,细胞活性的降低是必然的,要再实验过程中注意每个细节,减少细胞的损失量,同时操作要快,作用过程要适时恰当,这是我的理解。
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发表于 2013-5-21 22:10 |显示全部帖子
我是采用磁珠分选的,分选后阳性率可以,但死细胞较多,想问各位:1.分选说明书上说细胞离心采用300g,10min.大约2000rpm,我操作都在冰上,死细胞多是否是离心力太大,2.分选出来的细胞较多,一个实验又用不完,想问大家怎么养,以便第二天再做其他实验,是用原来的肿瘤细胞培养基,还是用无血清的肿瘤干细胞培养基,如果是后者,那就是用形成球状体的培养基,因此要用低粘附培养板。
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小小研究员

发表于 2013-5-22 00:13 |显示全部帖子
回复 yxhss 的帖子" T% j( o/ S# j3 n/ A

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优秀会员

发表于 2014-1-9 16:24 |显示全部帖子
1.拿去分选的细胞状态要好,尽量多。2.分选前和分选后把流式管放在冰上。3.分选动作快。
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